短期高位食管支架安全性及局部TNF-α表达的实验分析.pdfVIP

中文摘要 刚 置 取得成功以来，金属内支架以其操作简单，危险性小，成功率高，价 格_}f_J对便宜而』3一泛应用于治疗食管狭窄。 对于位置较高的食管狭窄，置人支架的最高点并未形成明确 的观点，未见有关高位食管支架的安全性的动物实验研究的有关 报道。 国内外研究发现，在组织损伤修复过程中，局部有大量的巨噬 细胞、T细胞、肥大细胞浸润，并表达出相关的致纤维化细胞因子。 食管支架置入后食管局部的损伤与修复，其调控机制与一般的损 伤与修复也可能存在一些相似性。 本研究通过在动物颈部食管置人支架，观察支架置人后动物 的反应，旨在分析支架对呼吸、吞咽等功能的影响，探讨高位食管 置人支架的安全性，为进一步的临床应用做准备。并于支架局部 食管取材，采用免疫组化的方法探讨支架置人后早期肿瘤坏死因 子d(TNF—d)在食管局部表达的机制。 r材料与方法 一实验对象与分组 成年健康犬11只，对照组2只，不放置支架，实验组共9只， 随机分为三组，每组3只，于置人支架后第三、五、七天处死。 二材料与仪器 DSA机、PHIL— 支架与推送器、SHIMADZUDIGITEX(a)2400 IPS MX8000多层CT、TNF一仪免疫组化试剂盒及其它仪器与药 品。 ·1． 三实验步骤 1术前准备术前12小时实验动物禁食水。 2麻醉与固定硫喷妥钠(30mg／kg)腹腔麻醉，仰卧位固定安 放牙垫。 3支架放置透视监视下经口置人支架。支架上缘距声门0．5 一lcm。支架远端丝线固定。正侧位摄片记录。 4CT扫描后行多平面重建及三维重建。 5实验动物饲养观察第一天禁食水，第二天开始流食。 6实验动物取材三组动物分别于置人支架后第3、5、7天处 死。肉眼观察食管外壁与食管粘膜变化。在支架上缘、中央、下缘 处食管的腹侧、背侧分别取材，对照组取材部位同实验组。10％中 性福尔马林固定。 7切片制作与染色标本经脱水、透明、浸蜡后制成石蜡包块， 每个标本切片5张。HE染色后显微镜下观察。 8检测TNF一0【表达石蜡切片脱蜡、水化，检测TNF一仪步骤 按说明书进行。最后DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。 四结果判定标准 TNF—d阳性细胞为胞浆染色。在光镜下观察切片，平均估 算着色细胞所占的百分率，分级标准：阳性细胞50％为++， 50％为+，无着色为一。 五统计学处理 使用SPSSl0．0统计软件包。TNF—d表达与时间、位置的关 系采用x2检验。两两比较采用X2检验的分割方法。以P0．05 为有统计学差异。 结 果 支架置入后平片可以清楚显示支架位置及支架上缘与声门关 系。cT平扫及重建发现气管、喉没有受压、受推移的表现。发现 ·2· 1只呕吐，2只轻微呛咳伴吞咽增多，5只吞咽动作增多，所有变化 2—5天后消失。所有实验动物呼吸顺畅，发音清楚，饮食正常，无 窒息、返流至鼻腔等。 实验组发现支架处食管外壁充血；第一组、第二组发现粘膜表 面充I缸、渗出，无坏死、溃疡；第三组食管粘膜面充血，并可见粘膜 点j状f}j血，没有发现坏死、溃疡、穿孔等。光镜下第一组可见粘膜 卜层水肿，小动脉迂曲扩张，炎细胞浸润；第二组粘膜下层水肿减 轻；第三组粘膜上皮增厚，粘膜下层水肿消失，炎细胞明显增多，粘 膜卜．层增厚，腺体萎缩。 7天后显著增多(P0．05)。食管腹侧与背侧组织中的TNF—Oc 的表达没有统计学差异(P0．05)。支架边缘与支架中央食管组 织中的TNF—Ot表达没有统计学差异(P0．05)。 结 论 短期内高位食管支架(上缘距声门距离0．5—1cin)安全可 行，无喉头水肿、呼吸困难等症状。但支架长期放置的效果还需要 进一步观察研究。 由于支架对食管壁的损伤，早期即可