单克隆抗体制备技术研究进展 - 生物在线.pdf

第 21 卷 　第 3 期 甘 肃 科 技 V ol. 21 　No . 3 　　　　　　　 2005 年 3 月 　　　Gansu Science and Technology 　　　　　　　　　　　M arch . 　2005 单克隆抗体制备技术研究进展 1 2 1 朱学泰 ;谢 　溱 ;马瑞君 ( 1. 西北师范大学 生命科学学院 ,甘肃 兰州 　730070 ;2. 兰州生物制品研究所 ,甘肃 兰州 　730046) 摘 　要 :单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具 ,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面 有着不可或缺的作用 。近年来 ,随着分子生物学技术的发展 ,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小 鼠、噬菌体展示技术 、核糖体展示技术及共价展示技术所产生的单克隆抗体 。这些技术将有效解决 单克隆抗体的鼠源性等问题 。本文主要对以上几种制备单抗的新技术作一综述 。 关键词 :单克隆抗体 ;人源抗体 ;转基因小鼠;展示技术 中图分类号 :R181. 36 　　1975 年 , Kohler 和 Milstein 创立了杂交瘤技术 瘤细胞中表达 。根据所用的载体质粒标记基因产 制备单克隆抗体 ,此后单克隆抗体迅速广泛地应用 物 ,选用适当的抗生素或试剂进行筛选 ,再用与传统 于生物学和医学的各个领域 。单克隆抗体可用于分 杂交瘤技术相似的方法克隆出分泌人鼠嵌合抗体的 析抗原的细微结构及检验抗原抗体未知的结构关 细胞株 。1980 年代中后期 ,科学家对嵌合抗体进一 ( ) 系 ;生产出针对复杂生物混合物中的特定分子的抗 步改进后 ,抗体基因只有互补性决定区 CDR 是鼠 体 ,可用于分离 、分析及纯化该特定分子抗原 ;其试 源成分 ,其余均为人基因序列 ,这实现了抗体的高度 剂可用于临床诊断和治疗 ,或用于以单抗为弹头的 人源化 。嵌合抗体不但具有与鼠源单抗相同的特异 “生物导弹”药物等 。 性 、亲和力和产量 ,而且可根据不同的需要接上不同 但单克隆抗体技术 自问世以来 ,在临床治疗方 亚类的人恒定区基因来改变抗体的功能 ,使用更加 面进展缓慢 ,主要原因是 目前单克隆抗体大多是鼠 灵活 。第一个人源化单抗 rituxan 是一个抗 CD20 源性的 ,而鼠源单抗应用于人体治疗时存在诸多问 的人鼠嵌合型单抗 ,在非何杰氏恶性淋巴瘤患者的 题 : 鼠源单抗在人体中常不能有效激活补体和 Fc 受 治疗中取得了良好的疗效 。目前 ,嵌合单克隆抗体 体相关的效应系统 ;被人体免疫系统所识别 ,产生人 基本主宰着治疗性单抗的商品市场 ,截止到 2003 年 ( ) 抗鼠抗体 HAMA 反应 ;且在人体循环系统中很快 初 ,共有 9 个单克隆抗体被美国 FDA 授予生物药许 被清除。因此 ,在保持对特异抗原表位的高亲和力 可证 ,都是人鼠嵌合抗体或人源化的抗体类型 。 的基础上人源化和全人化的改造 ,减少异源抗体的 虽然 CDR 仅 占整个嵌合抗体分子的 5 % 以下 , 免疫原性成为单抗研究的重点 。此外 ,传统杂交瘤 但仍有鼠源成分的存在 ,并未完全解决鼠抗体的免 技术还存在制备周期较长 ,成本较高 ,杂交瘤细胞不 疫原性问题 ,而且人源化过程繁复且费用昂贵 ,大量 稳定抗性会丢失等缺陷。近年来 , 随着分子生物学