神经生长因子、丹参对顺铂诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡抑制作用的实验分析.pdfVIP

中文摘要 神经生长因子、丹参对颓铂诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡 抑制作用的实验研究 摘 要 目的；探讨顺铂诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡作用的机制及 神经生长因子(NGF)、丹参对顺钓耳蜗毒性的防护作糟， 为临床防治蹶镳耳毒性住鹰提供理论依据。 材料趋方法：选择耳廓反射灵敏的纯种豚鼠24只， 体重3009-4009，随机分为正常对照组、顺铂组、NGF组 和丹参组，每组6只。正常对照组连续3天黢腔注射生理 盐水2ml。Kg一。d～；蹶锚组连续3天腹腔注射蹶铂 4mg．Kg～。d～；NGF缎和丹参组分别肌注NGF2000u．豫1．d1 和腹胶注射丹参注射液8m1．Kg～．d一，连用5天，从第3天起 给药30min后褥分稍羧腔注射顺铂4mg．KF‘．d～，联合用 嫠3天。各组动物绘药翦弱最后一次绘嚣24h蘑褥行ABR 测试，随后立即处死。每组2只耳蜗用4％戊二醛灌注固 定，取下1-2mm的3段基底膜，5．5％EDTA室温脱钙10 天，l％锇酸后固定，经脱水、浸透、包埋、聚合、超薄 切片鞫染色，透射电镜下蕊察。每组lO只耳蜗用4％多聚 甲醛灌注阉定，5．5％EDTA嶷温脱钙14天，乙醇系列脱 水，石蜡定向包埋，经中轴切片，每隔5张取l张，取10 张，l张骰骶染色，其能做TUNEL检测。 结果；正常对照组动物注射生理盐水蔻瓣饮食、体耋、 活动和耳廓反射均无明显变化，顺铂组动物随用药时间延 长出现饮食减少、体重减轻、活动迟缓、耳廓反射明显较 中文摘要 正常对照组迟钝，NGF组、丹参组也出现上述现象，但程 度较jlr顷,fl组轻。所有受试动物用药前耳廓反射均灵敏， ABR闽值差异无显著性(PO．05)。川药前后比较正常埘 照组听力无改变(P0．05)，其余三组均有听力损害 (PO．01)，用药后NGF组、丹参组听闽明显低予顺铂纰 (P0．01)，但均高于正常对照组(O．05P0．01)。透射电 镜下正常对照组动物耳蜗Corti氏器内外毛细胞、螺旋神 经节细胞形态正常，未见到凋亡现象。而顺铂组、NGF组 和丹参组动物耳蜗Corti氏器毛细胞、螺旋神经节细胞均 可见到凋亡现象，顺铂组凋亡细胞多于NGF组和丹参组， 其凋亡细胞核染色质有凝集、边移现象，核膜外凸，胞膜 皱缩、起泡，胞浆浓缩，内有空泡形成，细胞器未见明显 异常，毛细胞静纤毛排列紊乱，有倒伏、粘连现象，支持 细胞也有凋亡发生。TUNEL检测结果可见正常对照组无 TUNEL阳性细胞，其他三组均出现TUNEL阳性的毛细 胞、螺旋神经节细胞和支持细胞。胞核呈棕色，核膜胞膜 皱缩、不规则等细胞凋亡特征性改变。内外毛细胞均有阳 性细胞，外毛细胞多，分布以第一回末、第二回多见，三、 四回逐渐减少。一、二回比较差异无显著性(P0．05)， 二、三回比较差异有非常显著性(Po．01)，且从第一排向 第三排逐渐减少。内毛细胞的分布与此相反，尖回重，底 回轻。螺旋神经节细胞的TUNEL阳性细胞各回分布与外 毛细胞分布相同。三组给药动物耳蜗各回外毛细胞、螺旋 神经节细胞TUNEL阳性细胞数，以顺铂组最多，NGF组和 丹参组分别与顺铂组比较，差异均有非常显著性(Po．01)， 而NGF组和丹参组比较，差异均无显著性(P0．01)。 中文摘要 结论：顺铂耳毒性rI『诱导豚鼠工F蜗毛细胞、螺旋神经 节细胞、血管纹细胞和支持细胞的凋亡，引起Corti氏器 形态结构的改变，导致I听功能的损害。联合应川NGF、 月‘参可以有效的减轻顺铂诱导的豚鼠内耳细胞的凋亡现 象，维护正常的Corti氏器形态结构，改善听功能。本研 究为临床上应川NGF或丹参预防、治疗顺钔lI：市·陀捉供 了实验依据。 关键词：顺铂，神经生长因子(NGF)，丹参，耳蜗， 凋亡，毛细胞，螺旋神经节细胞。 一 一 叁查塑墨—— Nerve salvia factor(NGF)and growth