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FSH及PMSG对兔超数排卵效果比较探究
FSH及PMSG对兔超数排卵效果比较探究摘要:本试验通过注射总剂量60IU的促卵泡素(FSH)、孕马血清促性腺激素(PMSG)100IU和HCG对兔进行超数排卵处理,采用手术法,观察记录卵巢发育和排卵情况,结果使用FSH处理效果比使用PMSG效果好,FSH处理后卵巢排卵点明显高于PMSG。
关键词:兔;超数排卵;促卵泡素;孕马血清促性腺激素
迄今为止,超数排卵是获得大量整齐、优质的卵子或胚胎的一种有效方法,它为胚胎移植、克隆和转基因动物生产等提供了卵子和胚胎来源。对优良母畜进行重复超排,是充分挖掘良种母畜的遗传潜力和向社会提供大量优质胚胎的重要手段。因此,对同一供体反复超排处理能否取得满意的超排效果和回收到理想的胚胎,便成了人们普遍感兴趣的问题。实验分别使用FSH和PSMG对兔进行超数排卵,通过实验结果分析FSH和PMSG对兔超数排卵的影响,可以确定对兔超数排卵的最佳方案,为其他的研究提供基本依据。
1材料
1.1 实验动物 母兔6只,5月龄,分FSH组、PMSG组和对照组,每组2只,由延边大学农学院小动物实验室提供。
1.2 试验仪器 常规手术器械、实体显微镜、电子天平、手控的移卵管、拣卵针等。
1.3药品与试剂 FSH,批号:040902;PMSG,批号:040409;HCG,批号:030612,以上药品均由宁波激素制品有限公司提供;自制D-PBS液等。
2 方法
2.1冲卵液的配制
采用改良杜氏磷酸盐缓冲液(D-PBS),应现用现配。
2.2供体兔超排处理
FSH采用连续三天递减注射法,总剂量60IU,肌肉注射,每天早晚各一次,间隔12小时,第一天剂量为15IU/次,第二天剂量为10IU/次,第三天剂量为5IU/IU。PMSG采用一次肌肉注射法,总剂量100IU。FSH组在最后注射后耳缘静脉注射hCG 60IU,PMSG组在72h后耳缘静脉注射hCG100IU。对照母兔不做处理。注射hCG后立即将试验兔与试情公兔合笼,刺激排卵一小时,次日上午再刺激排卵2小时。72小时后进行手术观察。
2.3术式
切口位置在腹中线一侧,最末端乳头下方,直线切口3-4cm。皮下组织用组织剪层层剥离,切开腹膜,找到子宫和卵巢。
2.4观察排卵情况
从手术切口小心牵引出子宫和卵巢,观察两侧卵巢的大小、状态、卵泡数,排卵点,做好记录。
3 小结
3.1通过手术观察,经两种方法处理的兔卵巢发育良好,排卵点明显增多。PMSG处理的兔平均排卵点为30个,FSH处理的兔平均排卵点为39个,而对照兔平均排卵点为22个。可以看出,使用PMSG和FSH的超排效果比较理想,二者相比,使用FSH连续递减方法超排处理,效果比PMSG一次注射效果更好。
3.2由本实验结果可知使用FSH总剂量60IU,连续递减注射方法超数排卵,和PMSG 100IU一次注射的超数排卵方案相比,前者效果好于后者。
作者简介:李海峰(1973.3-),男,吉林九台人,硕士,讲师。
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