腈水合酶产生菌的分离鉴定及部分酶学性质研究.pdf

( ) 2005 年 2 月 四川大学学报 自然科学版 Feb. 2005 第 42 卷第 1 期 Journal of Sichuan University (Natural Science Edition) Vol. 42 　No. 1 文章编号 : (2005) 腈水合酶产生菌的分离、鉴定及部分酶学性质研究 1 2 1 1 , 1 1 邓　林 ,刘延岭 ,王忠彦 ,胡　承 ,孙　勇 ,段洪武 ( 1. 四川大学生命科学学院 ,成都 610064 ;2. 四川省食品发酵设计院 ,成都 610064) 摘要 :从长期被腈化物污染的土壤中筛选到一株腈水合酶产生菌 YL1. 经过对分离菌株形态 特征及生理生化指标的鉴定 ,该菌株初步鉴定为 Rhodococcus . 在含有丙烯腈的培养基中 ,细 胞的生长与产物腈水合酶的合成相关. 酶学性质研究表明 :酶反应最适温度为 30 ℃,最适 p H 为 70. 该酶在 50 ℃以下 ,p H 为 6. 0 至 9. 0 范围内较稳定. 关键词 :腈水合酶 ;红球菌 ;酶学性质 中图分类号:Q93 　　　　　文献标识码 :A 腈水合酶是一些微生物在进行肟或脲代谢过程中产生的一种蛋白质[1 ] , 日本学者Asano 等[2 ] 最先发 ( 现这一物质具有降解有毒物质乙腈的效果 ,并命名为“腈水合酶”. 由于具有高度的选择性 区域选择性和 ) [3 ] [4 ] 立体选择性 ,通过酶促反应可以将腈类物质转化成酰胺 、酸、醇、酯、氨基化合物 、烯胺等价值更高、 应用范围更广的一些化合物 ,因此在化工产品、手性化合物、医药中间体等的合成以及环境治理等方面具 有广泛的应用前景[5 ] . ( ) 利用微生物细胞产生的腈水合酶将丙烯腈转化为两烯酰胺 ,具有反应条件温和 常温常压 、设备投资 少、生产成本低、无污染、产品纯度高等优点 ,是生产丙烯酰胺的理想方法. 目前国内外对腈水合酶研究的 ( ) 重点都放在丙烯酰胺的酶法合成上 ,而对于使用腈水合酶处理含有机腈化物 如丙烯腈 废水的研究还较 少. 使用腈水合酶产生菌进行含腈化合物废水的综合治理不仅能够保护环境 ,提高人类健康 ,还能变废为 宝 ,生产出工业上有用的原料丙烯酰胺. ( ) 本文报道从长期被腈化物污染的土壤里分离出腈水合酶产生菌红球菌 Rhodococcus YL1 的过程 , 并对腈水合酶的部分性质进行研究. 1 　材料与方法 1. 1 　材料 1. 1. 1 　样品采集 　微生物土样采自于成都市三瓦窑化纤厂生产车间周边被腈化物污染的土壤. ( ) (