注射液局部用药安全性评价.ppt

中药注射剂局部用药安全性评价 过敏性试验 刺激性试验 溶血性试验 一、过敏反应 过敏反应是一种变态反应,即一型超敏反应. 当过敏原(包括抗原与半抗原,如异种血清,微生物代谢产物,花粉,某些药物或食物等)进入机体时,可以通过特殊机制,刺激机体产生抗体.这种抗体附着在肥大细胞上,此后当又有同样抗原进入机体时,即与抗体相反应,使肥大细胞释放出组胺等物质. 过敏原 刺激 机体 产生 IgE IgE与肥大细胞、嗜碱细胞结合 致敏靶细胞 脱颗粒释放活性介质（如组胺，白三烯等） 毛细血管扩张，通透性增加等 全身反应，呼吸道反应，皮肤反应 致敏阶段 发敏阶段 芦丁提取物过敏性试验 实验目的:观察动物重复接触受试药物后所产生的过敏反应情况. 动物：豚鼠（250—300g) 分组:阴性对照组(生理盐水) 阳性对照组(5%新鲜蛋清) 芦丁提取物组(供试品) 实验步骤 致敏反应：取豚鼠2只，隔天肌内注射芦丁提取物0.5ml，连续3次，并行阴性对照组和阳性对照组各为2只豚鼠。 激发反应：于首次注射后的第14天，腹腔注射芦丁提取物2-3ml，观察注射后有无用爪搔鼻、喷嚏、竖毛、抽搐、呼吸困难、大小便失禁、休克和死亡等反应。 10分钟内先后出现上述体征，30分钟内死亡。 过敏性实验评价标准 二、芦丁提取物刺激性反应 化学刺激 物理刺激 炎症等其它刺激 刺激性实验 实验目的:观察动物接触芦丁提取物后所产生的刺激反应情况. 动物:首选成年健康家兔(2Kg) 分组:阴性对照组(生理盐水) 阳性对照组(1%酒石酸锑钾注射液) 芦丁提取物给药组 股四头肌法 股四头肌在后肢大腿的前面，正中为股直肌，股直肌之下为股中间肌，股直肌之外为股外侧肌，股直肌之内侧为股内侧肌，四块肌肉合称股四头肌。 实验步骤 取健康家兔两只，分别于一侧后肢的股四头肌处注射芦丁提取物提取物3ml，于另一侧后肢的对应部位注射同容积的灭菌生理盐水作为对照。进针角度30-45度为宜。48h后试验家兔健康如常。将家兔由耳缘静脉注射空气处死，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位肌肉组织的反应。 并行阳性对照组： 1%酒石酸锑钾注射液 刺激性实验评价标准 将肌肉组织的反应分为六级： 0级（-）：注射供试品部位的肌肉组织与对照部位肌肉组织任何差异。 1级（+）：注射供试品部位的肌肉组织有充血，直径在0.5cm以下。 2级（++）：注射供试品部位的肌肉组织有红肿充血，直径在1cm左右。 3级（+++）：注射供试品部位的肌肉组织有红肿、发紫、光泽消失、可见坏死点。 4级（++++）：注射供试品部位的肌肉组织有红肿、发紫、光泽消失、坏死范围直径达0.5cm左右。 5级（+++++）：注射供试品部位肌肉的各项反应更重，有大片坏死。 刺激性实验评价标准 凡两只家兔的平均反应级数在2以下者可供肌肉注射之用；平均反应级数超过3者不能供肌肉注射之用；平均反应级数在2-3之间者可进行复试或结合其他项目考虑其临床试用问题。凡刺激性试验不能达到肌肉注射要求的知己制剂一般也不宜供皮下注射之用。 静脉注射制剂的安全性评价 静脉注射制剂根据我国药政部门的规定，要必须进行常规安全性评价，主要包括血管刺激性试验、体外溶血性试验、过敏性试验、热原试验等。 血管刺激性试验 实验目的:为确保注射液制剂安全性，检查制剂经多次静脉注射后对血管刺激性反应。 动物:家兔 分组:供试品组 生理盐水对照组 实验步骤 家兔8只，禁食16小时，随机分成2组，每组4只。设供试品组与生理盐水对照组。兔固定于兔箱， 药液通过消毒恒速注射器与小儿头皮针注入耳缘静脉内。每天给药1次，连续3天。 实验给药期间，观察动物全身反应、血管及周围组织的刺激性反应。 组织病理学检查 于末次给药完毕后两天，剪下各兔进针点前方的耳静脉及其周围组织一段（长约1.5cm）固定于福尔马林生理盐水溶液中，送病理学检查。 图1 0.9%氯化钠注射液对照组兔耳静脉血管（HE 3.3×10） 图2 银杏叶提取物注射液组兔耳静脉血管与对照组比较无明显改变（HE 3.3×10） 三、体外溶血试验 实验目的:为确保注射液制剂安全性，检查制剂,有无溶血和红细胞凝集等反应。 动物:家兔 供试品：芦丁提取物 实验步骤 2%兔红细胞生理盐水混悬液制备： 取兔1只，颈动脉放血，将血盛于放有玻璃珠的烧杯内，轻轻摇荡约10分钟，除去纤维蛋白， 用生理盐水反复洗3-4次，将所得红细胞按其容积，用生理盐水稀释成2%的混悬液。 实验步骤 试管7支，编号后依次排列于试管架上，按表格分别加入2%兔红细