论述临床病原学检查.ppt

一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 1.定义：对敏感性不能预测的临床分离菌株进行药敏试验，以指导临床选择治疗药物和了解区域或医院内常见病原菌耐药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。 * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 2.常用敏感性试验方法 ⑴手工试验:①K-B纸片琼脂扩散法 结果表示:S-Susceptible I-Intermediate R-Resistant ②稀释法（MIC） ③Etest ④联合药敏试验 * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） ⑵自动化仪器 Vitek，Microscan ⑶分子试验 PCR直接检测mecA基因 ⑷补充试验 Nitrocefin * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 3.药敏试验结果与临床抗生素剂量关系 敏感(S)——一般剂量有效，推荐使用该抗生素用于临床治疗 中介(I)——大剂量有效，提示药物MIC接近体液或组织可达到药物浓度 耐药(R)——大剂量无效,即常规用药剂量不能达到MIC * 一.抗微生物药物敏感性试验（AST） 4.K-B纸片扩散试验的影响因素 琼脂厚度 与抑菌圈直径成反比 菌液浓度 与抑菌圈直径成反比 药敏试纸 含量–与抑菌圈直径成反比 保存温度–20℃，使用前室温平衡 30min后开启 湿度-密封容器，硅胶防潮 NCCLS标准 培养种类(MH),厚度(4mm) 接种量(0.5MF) 选药标准,判读标准,质控标准 * 质控参考菌 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 大肠埃希菌 ATCC 25922 铜绿假单胞菌 ATCC 26853 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 1.耐药菌株： 耐甲氧西林葡萄球菌（MRS） 耐青霉素肺炎链球菌（PRSP） 耐万古霉素肠球菌（VRE） 质粒介导的超广谱?-内酰胺酶（ESBL） 多重耐药的铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌和不动杆菌 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 2.耐药机制： ⑴药物渗入细菌减少 ⑵产生灭火酶和钝化酶(?-内酰胺酶) ⑶细菌抗生素结合蛋白发生改变（PBP） ⑷代谢拮抗剂产生 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 3.耐药性监测的特殊试验 ⑴ ?-内酰胺酶检测 方法:头孢哨噻吩滤纸片法(nitrocefin) 意义: ?-内酰胺酶检测阳性,即对青霉素、氨卞西林等抗生素耐药 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 ⑵超广谱?-内酰胺酶检测（ESBL） 定义：是水解青霉素，一代、二代和三代头孢菌及单酰胺类药物的酶，产生ESBL的细菌对上述抗生素耐药。 ESBL主要存在于大肠杆菌和肺炎克雷伯菌等革兰阴性菌中。 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 ⑵超广谱?-内酰胺酶检测（ESBL） 方法：纸片扩散法和稀释法 意义：ESBL阳性预示对头孢泊肟、头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松和氨曲南等抗菌药物无效。 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 ⑶琼脂筛选试验（agar screen test） 是以单一药物单一浓度检测细菌耐药性，如耐甲氧西林葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌检测。 * 二.耐药机制及耐药性监测试验 ⑷耐药基因检测 如MRSA中mecA基因检测 * 耐药性统计和分析 　WHONET 建立本院、本地区和本国的细菌耐药性监测数据库和网络 * 第三节 医院感染检查（Nosocomial Infection） * 医院感染检查 1.定义:病人入院时不存在,也不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括医院内获得而在出院后发病的感染。 * 医院感染检查 2.医院感染常见病原体（细菌）：革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌（MRSA）、厌氧菌和深部真菌等 * 医院感染检查 3.感染源: 外源或内源性病原体 外源性：其他住院患者、医务人员、探望者（多为条件致病菌） 内源性：患者自身皮肤、口腔、咽部和胃肠道固有的正常菌群等（免疫力低下患者） * 医院感染检查 4.常见临床类型 下呼吸道感染 尿路感染 手术切口感染 胃肠道感染 血液感染 皮肤和组织感染 * 医院感染检查 5.感染途径： 接触传播 空气、飞沫传播 经注射或输液、输血传播 经口传播 * 医院感染检查 6.易感因