循环内皮细胞评价病理状态下血管内皮功能的重要生物标记物.pdf

中国微循环 2009年 10 月第 13卷第 5期 　　　　　 ·43 1 · 文章编号 :(2009) ·综述 · 循环内皮细胞 :评价病理状态下 血管内皮功能的重要生物标记物 韩建群 ,李炳蔚 ,苑晓晨 ,修瑞娟△ 中图分类号 : R361+ . 3　　　　文献标识码 : A 　　1　前言 进行鉴定 ,只得依靠形态学的特点来计数 CEC s,按照 循环 内皮细胞 ( circu lating endothelial cells , 现在的标准来衡量 ,当时的结果并不精确 。 CEC) 是指能够在外周血中测得的血管内皮细胞 ( 3　CEC s的检测 va scu lar endothelial cells , V EC) 。血管内皮细胞具 人体在正常状态下 , CEC s 的数量非常少 。因 有多种生理功能 , 参与机体血管的舒缩 、凝血 、炎 此研究人员一直希望找到一种灵敏度高 ,稳定性强 症 、免疫 、物质转运和生物活性物质释放等多种生 的检测方法 。 命活动 。正常状态下 , 内皮细胞每天的更新率大约 最初 , CEC s的分离和计数依赖于形态学的方 0% ～1% ,因此正常人体内 CEC s的数量非常少 ,然 法 。H ladovec等 [ 2 ] 采用离心血液标本的方法分离 而在内皮受损的病理状态下 ,循环内皮细胞会发生 CEC, 进 而 进 行 人 工 计 数 。1985 年 Sam aden 以 数量和形态学的变化 。 H ladovec法为基础 , 使用 PV P - Silica密度梯度法 , 目前评判 内皮功能和稳态的指标包括血流介 分离出的细胞可以体外培养 。此外还有 Perco ll密 ( 导的内皮依赖性血管扩张功能 flow - m ediated en 度梯度离心法 :在抗凝血标本的上清液中加入 Per dothelial - dep enden t va sod ilation FMD ) 、von W ille co ll液 ,离心后标本分三层 ,在上 、中层中获得 CEC。 b rand 因子 、E - 选择素和凝血调节蛋白等血清蛋白 以上的几种方法都普遍存在血小板的干扰 ,而 因子 ,但上述指标多是间接反映内皮的变化 ,而且 且要求计数人员有很好的对细胞形态辨别的经验 , 还存在特异性不高 ,敏感性低等问题 。与以上指标 同时还存在着细胞继发性损伤和缺乏 CEC s特异性 相比较 , Takaha sh i等认为 CEC 是 目前在活体 内唯 标记等问题 ,因此这类方法仅在一些探索性研究中 一可 以直接反映血管 内皮损伤 的标志物 。检测 使用 。 CEC是研究活体内血管内皮的一种非创伤性方法 , ( ) Takaha sh i将因子 V III相关抗原 vW F 的荧光 并能通过对其体外培养 ,深入地研究和探讨疾病的 抗体用于了 CEC s 的测定 , 即用间接免疫荧光抗体 病理生理机制 。 法将细胞进行染色 , 在荧光显微镜下进行细胞计 2　CEC s概念的提出 数 。此方法在辨认血管内皮细胞的准确性上有所 1970年 , Gaynor等 [ 1 ] 在经内毒素处理的家兔血 提高 , 但是血小板会与 内皮细胞重叠不易清楚分 液中,发现有大量的脱落细胞 ,而且这种细胞的数量