香蕉水通道蛋白基因的克隆与表达分析.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2008，36(29)：12596—12599 责任编辑 张杨林 责任楚蓼 马君叶 香蕉水通道蛋 白基 因的克隆与表达分析 谢学立，刘菊华，徐碧玉，金志强 (中国热带农业科学院生物技术研究所，海南海口571101) 摘要 [目的]更好 了解香蕉果实与水分代谢的关系。[方法]依据从抑制差减杂交文库(SSH)中获得的一个eDNA序列，设计5和3 RACE引物，从香蕉果实中扩增基因5和3末端片段 ，并用RT—PCR的方法探讨该基因在香蕉各组织中的表达情况。[结果]获得一个 1132bp的水通道蛋白全长基因，命名为MaPIP1；1。MaPIP1；1基因包含861bp的完整阅读框架，编码的蛋白有6个跨膜结构及 aspara— gine—proline—alanine(NPA)和aromatic／arginine2个保守区。其与水稻水通道蛋白基因OsPIP1；2在氨基酸序列上有94．1％的一致性和 97．9％的相似性。且MaPIP1；1在香蕉各器官中均稳定表达。[结论 】MaPIP1；1可能与香蕉的水分代谢相关。 关键词 香蕉；水通道蛋白；表达；半定量PCR 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2008)29—12596—04 AnalysisoftheCloneandExpressionoftheAquaporinGeneofBanana XIEXne—lietaI (InstituteofTropica1BioscienceandBiotechnology．ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，Haikou，Hainan 571101 Abstract 0『biective]Therelationshipbetweenbananafruitandwatermetabolismwasunderstood．MethodlBasedonsuppressionsubtrac— tivehybridizationfromthelibrary(SSH)，aeDNAsequencewasobtained，5and3 RACEprimersweredesigned；andthen，thegeneflag— mentsatthe5and3 endwereamplifiedinthebananafruitandRT—PCRmethodwasusedtoexplorethegeneexpressioninbananaorganiza— tions．[Results]A1132bpeDNAwith861bpopenreadingflameencodinga286aminoacidsaquaporinortholog，named PIPl；1，was successfullyclonedandcharacterizedfromthefruitofbanana(Musasp．，AAAgroup，Cavendishsubgroup，cuhivar W‘illiams’)．Thede— ducedMaPIP1：1proteincontainedsixputativetransmembranedomainswithtwohighlyconservedmotifsofasparagine—proline—alanine(NPA) andaromatic／arginine(ar／R)regionfoundinthemajorintrinsicprotein(MIP)family．The HPl；lexhibitedthesequenceidentitytorice geneOsPIP1：2(94．1％)．Semi—quantitativeRT—PCRrevealedthatMaPIPl；1wasconstitutivelyexpressedinal1ofthetissuesofbanana． C『onclusion]TherecouldbearelationshipbetweenwasMaPIPl；1andwatermetabolismofbananafruit． Keywords Banana；Aquaporin；Expression；Semi—quantitativeRT-PCR 第一个植物水通道蛋 白在 1993年被发现…。水通道蛋 RACE弓l物 (5一ACCTTCATCCTCGTCTACACTG一3)；5一ad