取的要点.ppt

2)不对称峰峰高和峰面积的测量 第一法：峰高×峰宽的平均值 式中：h—峰顶到峰底线的垂直距离 ?（b0 .15+b0.85)—峰高0.15处和峰高0.85处的峰宽平均值 * 第二法：峰分割计算后加和法 A=A1+A2 =h1×b1+h2×b2 第三法：大峰上的小峰峰面积的测量 第四法：基线漂移时色谱峰峰面积的测量 第五法：重叠峰峰面积的测量 * 3.定量校正因子的测定 （1）绝对校正因子（fi) ★ fi的物理意义:单位峰面积所代表的I组分的量,是一个与i组分的物理化学性质和检测器的性质有关的常数 ★定量校正 因子的计算公式为： 注意:峰高定量校正因子fi(h)受操作条件影响较大 * 例： 某试样合有5μg乙醇，测得相应的色谱峰面积为150mm2，求乙醇的fi。 解： 即每平方毫米色谱峰面积代表3.3×10-2μg乙醇 * 例： 准确称取一定质量的色谱纯对二甲苯、甲苯、苯及仲丁醇，混合后稀释，采用氢焰检测器，定量进样并测量各物质所对应的峰面积，数据如下： 物质 苯 仲丁醇 甲苯 对二甲苯 m/μg 0.4720 0.6325 0.8149 0.4547 A/cm2 2.60 3.40 4.10 2.20 以仲丁醇为标准，计算各物质的相对质量校正因子。 * * 例:取二甲苯生产母液1500mg，母液中合有乙苯、对二甲苯、邻二甲苯、间二甲苯及溶剂和少量苯甲酸，其中苯甲酸不能出峰。以150mg壬烷作内标物，测得有关数据如下： 物质 壬烷 乙苯 对二甲苯 间二甲苯 邻二甲苯 Ai/cm2 98 70 95 120 80 f`m 1.02 0.97 1.00 0.96 0.98 求:各组分的含量。 * 解：母液中苯甲酸不能出峰，所以只能用内标法计算。由各组分的绝对校正因子计算得壬烷、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的相对校正因子分别为1.00，0.95，0.98，0.94，0.96。 根据内标法计算公式，对于乙苯有： 同样可以计算出对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的质量分数分别为9.5%，11.5%，7.84%。 * 毛细管电泳与HPLC的比较 * 例如： ? 为200nm的光，一个光量子的能量是： 由于光量子能量小（10-19J），因此定义： 1eV（电子伏）= 1.6021?10-19 J 则 * 例1. 有一单色光通过厚度为1cm的有色溶液,其强度减弱20%。若通过5cm厚度的相同溶液, 其强度减弱百分之几? 解： lgT1 c1 ───── = ─── lgT2 5c1 lgT2 = 5lgT1= 5×lg0.80 = - 0.485 T2= 32.7% , 即减弱67.3% * 吸光度具有加和性。A总＝Aa + Ab + Ac + …。 应用; ①进行光度分析时，试剂或溶剂有吸收，则可由所测的总吸光度 A 中扣除，即 以试剂或溶剂为空白的依据； ②测定多组分混合物； ③校正干扰。 * 例：氯霉素（Mr ＝323.15）的水溶液在278nm有最大吸收。假设用纯品配制100ml含2.00mg的溶液，以1.00cm厚的吸收池在278nm处测得透光率为24.3％。求吸光度A和吸光系数ε、 。 解：A=-logT=-log0.243=0.614 * 例： 钛-H2O2和钒-H2O2络合物的最大吸收波长分别在415nm和455nm处，取50.00mL 1.06×10-3mol/L钛-H2O2溶液，定容100mL, 以1cm比色皿在415nm和455nm处测得吸光度分别为0.435和0.246; 取25.00mL 6.28×10-3mol/L 钒-H2O2溶液，定容100mL, 以1cm比色皿在415nm和455nm处测得吸光度分别为0.251和0.377。取20.00mL钛钒混合液，加入H2O2显色后定容为100mL，以上述相同的条件测得A415=0.645, A455=0.553, 求原混合液中钛和钒的浓