第27号标准诊断规程DP6柑橘溃疡病.PDF

本诊断规程由标准委员会代表植物检疫措施委员会于2014 年8 月通过。 本附件是ISPM 27 ：2006 标准规定的一部分。 ISPM 27 附件6 国际植物检疫措施标准 第27 号标准：诊断规程 DP 6 ： 柑橘溃疡病菌 （Xanthomonas citri subsp. citri） （2014 年） 目录 1. 有害生物信息2 2. 分类信息2 3. 检测3 3.1 有症状植株的检测3 3.1.1 症状3 3.1.2 分离4 3.1.3 血清学检测：间接免疫荧光法4 3.1.4 分子检测5 分子检测的对照5 从受侵染的柑橘组织中提取DNA6 常规PCR 6 实时PCR 7 3.1.5 常规与实时PCR 结果的解读 8 3.1.6 通过生测进行检测9 叶牒接种检测9 离体叶片富集9 3.2 无症状植物的检测9 4. 鉴定 10 4.1 PCR 法 10 4.2 血清学检测 12 4.2.1 双抗体夹心法ELISA 12 《国际植物保护公约》 DP 6-1 DP 6：2014 限定性有害生物诊断规程 4.2.2 间接ELISA 13 4.3 致病性检测 13 4.4 描述与生化特征 13 4.5 分子鉴定 14 4.5.1 多位点序列分析 14 4.5.2 Rep-PCR 指纹分析………………………………………………………. 14 5. 记录 15 6. 获取进一步信息的联系点 15 7. 致谢 16 8. 参考文献 16 9. 图20 1. 有害生物信息 柑橘溃疡病菌 （Xanthomonas ci tri subsp. Citri ）是柑橘细菌性溃疡病的主要致 病因子。它对在亚洲、南美洲、大洋洲和非洲很多国家，以及美国佛罗里达州广泛 存在的热带和亚热带条件下种植的 （CABI ，2006 ：EPPO ，2006 ），以柑橘属 （Citrus spp. ）、金橘属 （Fortunella spp. ）和枳属 （Poncirus spp. ）为主的很多芸 香科 （Rutaceae ）栽培种造成危害 （EPPO ，1979）。一些寄主范围有限的非典型柑 橘溃疡病菌菌株已被鉴定并命名为菌株 A* 和 Aw （Sun 等，2004 ；Vernière 等， 1998）。菌株 A* 自然条件下在亚洲危害墨西哥莱檬 （Citrus aurantiifolia ）。菌株 Aw 自然条件下在美国佛罗里达引起墨西哥莱檬和大叶莱檬（Citrus