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组织学和胚胎学 Histology and Embryology 授课教师 焦艳 首先,开课前问几个问题? 你是由什么构成的? 你是怎么来的? 肾组织 胚 胎 本课程的结构 本课程共十五章,共20学时 课程共分成两个部分 基本组织 器官与系统 绪论 一、组织学和胚胎学的学习内容 组织学(histology):用显微镜技术研究正常 人体微细结构及其相关 功能的学科 胚胎学(embryology):研究人体发生、 生长及其发育机 制的一门科学 胚胎学研究内容: 受精卵 组织学研究内容: 细胞 细胞间质 组织 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 器官和系统 人体 胚 胎 儿 (2~8周) (9~38周) 与其它课程的关系 基础课程 ① 结构决定了功能,学习组织学是为学习生理学打基础 ② 正常的组织结构是异常的病理改变的对照标本,只有掌握了“正常”,才能识别“异常”,所以学习组织学也是为学习病理学打基础 正常肾皮质 急性渗出性肾小球肾炎 组织学的发展 二、组织学和胚胎学研究技术 光学显微镜术 电子显微镜术 组织化学技术 其他技术 (一)光镜技术(LM) 分辨率约为0.2μm可将物体放大约1500倍。 石蜡切片术(paraffin sectioning) 其基本操作程序是: 取材→固定(甲醛)→脱水(酒精)→透明(二甲苯)→包埋(石蜡)→切片(切片机,5-7μm)→脱蜡(二甲苯)→染色(HE染色)→封固 最常用的是苏木精—伊红染色法 (hematoxylin –eosin staining),简称H-E染色法 苏木精为碱性染料,能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫兰色。伊红为酸性染料,能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。 何谓嗜碱性和嗜酸性? 组织中的某些结构,易于被碱性染料着色的性质,称嗜碱性(basophilia),嗜碱性结构可被苏木精染成紫蓝色 易于被酸性染料着色的性质,称嗜酸性(acidophilia)。嗜酸性结构可被伊红染成红色 对碱性或酸性染料亲和力均不强者,称为中性 其它常用特殊染色法 ⑴ 镀银染色:如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银溶液中,可将神经元染成棕黑色或棕黄色。 若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中,再经5%甲醛液还原,能将网状纤维染成黑色,胶原纤维呈褐色。 醛复红→弹性纤维染成紫色 有些结构染色后其呈现的颜色与所用染料的颜色不同,例如用蓝色染料(甲苯胺蓝)染肥大细胞时,其胞质中的颗粒呈现紫红色,这种现象称为异染性 除石蜡切片外,还有 火棉胶包埋:眼球、睾丸 冰冻切片将组织块立即放置到液氮(-196℃)内快速冻结,用恒冷箱切片机制成冷冻切片。 涂片将游离的细胞直接涂在玻片上染色,如血液涂片、宫颈粘液涂片 铺片将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄片,铺在载玻片上 磨片将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成薄片 (二)电镜技术 电子显微镜与一般光镜不同:①以电子束代替可见光;②以电子透镜代替光学透镜;③用荧光屏使电子束呈像;④可将微细结构放大几万倍至几十万倍,分辨率可达0.2nm,而光学显微镜只放大约1000倍,最高分辨为0.2μm。 1. 透射电镜术(TEM) ① 取材(更新鲜)和固定(戊二醛和锇酸) ② 脱水和包埋 ③ 切片:用超薄切片机切片,切成厚约50~100nm的超薄片。 ④ 染色(硝酸铅、醋酸铀等重金属盐) 超薄切片机 透射电镜带扫描附件, 可观察样品内部及表面的超微结构 透射电镜下的线粒体 2. 扫描电镜术(SEM) 用于观察组织、细胞和器官表面的立体结构,分析物体的立体形象。不需要制成薄切片。 固定→脱水→干燥→喷镀金属
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