无孔单分散亲水性强阳离子交换固定相的制备及其在蛋白质快速分离中的应用研究.pdf

!# 年$ 月 色 谱 ’() !% *’) ! !#$% !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 !’ ( $% 无孔单分散亲水性强阳离子交换固定相的制备及其 在蛋白质快速分离中的应用研究 ，! 朱金霞 ，, 卜春苗 ，, 龚波林 （) 宁夏大学能源化工重点实验室，宁夏 银川 -)! ；! ) 宁夏大学生物技术重点实验室，宁夏 银川 -)! ） 摘要：采用分散聚合法制备小颗粒种子及“一步种子溶胀聚合”法成功地制备了粒径为$. !- 的无孔单分散亲水 性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂，其表面经水解、环氧化、再水解后与氯磺酸反应，制备了一种新型的强阳离子 交换色谱填料（:9; ）。详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能及流动相中盐的种类、有机溶剂、流速等对蛋 白质保留的影响。实验结果表明，在流速为% -= -.0 时，采用线性梯度洗脱，. -.0 内可快速分离% 种标准蛋白 质，蛋白质的保留符合阳离子交换色谱规律。将 :9; 应用于快速纯化鸡蛋清中的溶菌酶和猪心中的细胞色素+ 9 ， 取得了较好的效果。 关键词：无孔单分散亲水性聚合物微球；强阳离子交换色谱；蛋白质分离 中图分类号：#)+, , 文献标识码：?, , 文章编号：++- $ （!# ）!+ !’+#, , 栏目类别：研究论文 !#$%%’() (* +(), -%’() ./01%),# !%02’),3 4%3#5 () 6()(5’3$#3# 785($1’9’0 :();!((3 =#3’)3 %)5 1#’ ?$$9’0%’() *( @%3 +#$%%’() (* !(#’)3 @AB C.01. ，D 9%30-.’ ，E*E D’(.0 ，! （!! #$ % ’()*()$ (+ ,-#).$ / 01#2345 ,-.3-##)3-. ，6 3-.73 8-39#):3*$ ，;3-41- #$%%! ，013- ； ! #$ % ’()*()$ (+ = 3(*#41-(5(.$ ，6 3-.73 8-39#):3*$ ，;3-41- #$%%! ，013- ） ?A3%0 ：!’0’8.FG5#F5 ，$. !- 0’0+G’#’3F %H8#’G%.(.$ G’(H （6(H$.8H(-5I%$#H(I5+ $’+ 5I%H(+ 5058.-5I%$#H(I5 ）G#I.$(5F J5#5 G#5G#58 7H 0 ’05+ FI5G FJ5((.06 08 G’(H-5#.2I.’0 -5I%+ ’8) 4%5 G#I.$(5F J5#5 -’8.K.58 I’ 75 FI#’06 $I.’0 51$%065 （:9; ）FII.’0#H G%F5 K’# %.6% G5#K’#-0$5 (.L3.8 $%#’-I’6#G%H （AM9 ）.0 I%5 K’((’J.06 FI5GF) N.#FI ，I%5 G#I.$(5F J5#5 $’-G(5I5(H %H8#’(H258) :5$’08 ，I%5 %H8#’(H258 G#I.$(5F J5#5 I#5I58 J.I% 5G.$%(’#%H8#.0 K’((’J58 7H 0’I%5# %H8#’(HF.F ’K I%5 05J(H .0I