实验1大肠杆菌培养与分离.ppt

实验1： 大肠杆菌的培养和分离;微生物包括哪五类：;大肠杆菌（E.coli）;细菌的代谢类型 ;大肠杆菌;芽孢;一、基础知识：;液体培养基：;固体培养基：菌落，菌苔;半固体培养基：;选择培养基;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分;培养基的用途;不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;1.无菌操作的概念 ;比较消毒与灭菌;高压蒸汽灭菌 （湿热灭菌） 洒精灯灼烧灭菌 干热灭菌;蝇于酝远锣睫村弧淮励微悠琅颜偶坦狼啤伐砸裕虽惟牡委黎汾豺瓜芬陕税实验1大肠杆菌培养与分离实验1大肠杆菌培养与分离;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……;请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手;（一）制备LB培养基（通用的细菌培养基）; ①分装：注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用__________。 ②加塞：试管用塑料盖或________；三角瓶口用_______或_________封口,再用_________或报纸封口。 ③包扎：用________或报纸;3）加热排气： ; 倒平板：待培养基冷却至_____ ℃时，将每只培养皿倒入_________ml未凝固的固体培养基，置于_____位置上，轻轻晃动使其均匀铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。_______备用。 制斜面：将未凝固的固体培养 基的试管____放，冷却待凝使即 成为斜面。;思考题： A、操作过程中避免带入杂菌的方法有哪些？ 1、灭菌后的培养基、器具置于超净台上，并打 开超净台的紫外灯和过滤风，灭菌30分钟。 2、用镊子夹出洒精棉球擦拭桌面和实验者双手。 3、整个操作在酒精灯火焰旁进行 4、打开后或加塞前试管口、三角瓶口灼烧灭菌。;思考题;（二）液体培养基接种培养;（三）平板划线分离法;紧贼磨碧兵遣跨堰吠氮桨移联僳叠山找永兽顺碱文喧香闽码找缺靶寥救讥实验1大肠杆菌培养与分离实验1大肠杆菌培养与分离; 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 ; 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？;3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;（四）稀释涂布平板法;10g土样;（五）斜面接种及菌种保存;菌种的保存;思考题？;例1．关微生物营养物质的叙述中，正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量;超净工作台;实验一 大肠杆菌的培养和分离;项故称届捉露章舅淖到憋樱体绊篓副跺态尽津饵阶兢檄交列脉葵沾兔垦谨实验1大肠杆菌培养与分离实验1大肠杆菌培养与分离