生物试验专题.PPT

生物实验专题 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 1.配置斐林试剂 鉴定脂肪 将染色的花生切片置于显微镜下观察： 鉴定蛋白质 蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应。 显微镜的使用 1.用低倍镜观察。 （1）对光：调节反光镜和光圈。 （2）调焦：先用粗准焦螺旋，再用细准焦螺旋 （3）观察，并将要进一步观察的材料移到视野中央 2.用高倍镜观察。主动镜头转换器将高倍镜对准通光孔。 思考： 1.显微镜的放大倍数为： 观察细胞质的流动 1.制作装片：在载玻片上滴一滴清水，，将材料放在清水中央，盖上盖玻片。 2.观察 观察植物细胞的有丝分裂 1.解离 在10时至14时剪下洋葱根尖2~3mm，置于15%盐酸和95%酒精的混合液中解离2~3min（至酥软）。（使组织中的细胞相互分离开来） 3.染色 将根尖放在培养皿中，用龙胆紫染色3~5min。 4.制片： 用镊子将根尖弄碎，盖上盖玻片，在其上再加一片载玻片，用拇指压片。 5.低倍镜观察:寻找分生区 比较过氧化氢酶和铁离子的催化效率 新鲜的肝脏研磨液 结论:酶具有高效性 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用 叶绿体中色素的提取和分离 原理: 1.光合色素能溶解在丙酮中，因此可以用丙酮提取色素。 操作:1.将叶片剪碎,放在研钵中，加入少量SiO2和CaCO3研磨.. 结果: 橙黄色 观察植物细胞的质壁分离与复原 原理: 细胞液浓度外界溶液浓度 操作: 1.取洋葱表皮制作临时装片. DNA的粗提取和鉴定 原理: 1.DNA在不同浓度的NaCl中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl中溶解度最小__容易析出. 操作： 1.提取鸡血细胞的细胞核物质 将制备好的鸡血细胞液5~10mL，注入到烧杯中，向烧杯中加入20mL蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，使血细胞加速破裂。用纱布过滤，取滤液。 3.析出含DNA的粘稠物 沿烧杯壁缓慢加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，加蒸馏水至粘稠物不再增加。 4.滤取含DNA的粘稠物 用放有多层纱布的漏斗过滤，取纱布上的粘稠物。 5.用2mol/L的氯化钠将DNA的粘稠物再溶解。 6.过滤含有DNA的氯化钠溶液，取滤液。 8.DNA的鉴定取两支试管，各加入浓度为0.015mol/L的氯化钠溶液，将丝状物溶解，然后，向两支试管各加入4mL的二苯胺试剂。水浴煮沸5min. * * 一、还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。 葡萄糖、 果糖等 0.05g/mL的NaOH +0.05g/mL 的CuSO4 2.加入组织样液 3.水浴煮沸2min 苏丹Ⅲ：橘黄色 苏丹Ⅳ：红色 组织样液+0.1g/mL的NaOH+0.01g/mL的CuSO4 提供碱性环境 反应物 显微镜的结构 目镜放大倍数×物镜放大倍数 2.物镜的镜筒的长度与放大倍数 的关系： 放大倍数越大，镜筒越长（目镜 则相反）。镜头与玻片之间的距 离就越短。 3.要把视野左下方的材料移到 视野的中央，应该怎样操作？ 向左下方移动 4.将低倍镜换用高倍镜后，视野 的细胞数目和亮度怎样变化？ 细胞数目减少，亮度变暗。 2.漂洗 将根尖取出，用清水漂洗 10min。 6.高倍镜观察 思考:在显微镜 下观察到的哪 一个时期的细 胞最多? FeCl3 +H2O2 +H2O2 酶较多 堵住试管口 堵住试管口 插入点燃的卫生香 插入点燃的卫生香 产生大量的气泡 产生少量的气泡 卫生香燃烧猛烈 卫生香燃烧猛烈 非还原性糖 水解 葡萄糖+果糖 蔗糖 还原性糖 水解 麦芽糖 水解 葡萄糖 原理: 淀粉 +2mL淀粉酶 2mL淀粉溶液 2mL蔗糖溶液 60度水浴5min 斐林试剂 + 水浴煮沸1min 产生砖红色沉淀 2.不同色素在层析液中的溶解度不同， 溶解度大的就在滤纸中扩散得快， 溶解度小的就扩散得慢. 帮助研磨 保护色素 2.过滤,注意防止挥发. 3.制作滤纸条,画滤液细线. 4.将层析液倒入烧杯， 将滤纸条朝下一端插入层析液， 不能让层析液触及滤液细线. 胡萝卜素 黄色 叶黄素 蓝绿色 叶绿素a 黄绿色 叶绿素b 细胞液浓度外界溶液浓度 细胞失水 质壁分离 细胞吸水 质壁分离 复原 2.用显微镜观察。 3.在盖玻片一侧滴加0.3g/mL的蔗糖溶 液，用吸水纸引流.重复几次. 4.高倍镜观察质壁分离. 5.在盖玻片一侧滴加清水,用吸水纸引流. 重复几次. 6.高倍镜观察质壁分离复原. 2.DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些 物质可以溶于酒精。 ____提取杂质较少的DNA 3.DNA遇二苯胺变蓝____鉴定DNA. 2.溶解细胞核内的DNA 将5mol/L的氯化钠40mL加入到滤 液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min。 7.提取含杂质较少的D