中华蜜蜂两种化学通讯相关蛋白基因时空表达分析.pdf

农业生物技术学报 JournalofAgficulturalBiotechnology 2009，17 (1)：73～77 · 研究论文 · 中华蜜蜂两种化学通讯相关蛋白基因时空表达分析木 李红亮 ，王海燕 z，高其康 2*ge，程家安2 (1．中国计量学院生命科学学院，杭州310018；2．浙江大学昆虫科学研究所 ，杭州310029) 摘要：利用Real—timePCR技术对中华蜜蜂(Apisceranacer~-la)两个化学通讯相关蛋白：气味结合蛋白Ac-ASP2和化学感 受蛋 白Ac-ASP3基因的时空转录谱进行了研究。结果表明，Ac-ASP2是一个特异表达于中蜂触角的基因，在幼虫及蛹中均不 表达；利用2- 的相对定量方法，发现Ac-ASP2在成虫触角中具有几个丰度较高的日龄 ，即 1、9、15、27和30日龄 ，这几个高 表达 日龄均较其它时期高出近 10倍以上；利用标准曲线的绝对定量方法 ，Ac-ASP3在其不同器官中的原始拷贝数为：翅腹 胸 足触角头，其中翅、腹和胸部模板拷贝数较高 (均达到 10数量级)，而在足、触角以及头中的拷贝数相对较低(均为 l0数量级)，表明Ac-ASP3与中蜂翅与腹部的化学感受行为有密切的关系。 关键词：Real。timePCR；中华蜜蜂；化学通讯；时空表达 中图分类号：S188 文献标识码：A 文章编号：1006—1304(2008)01。0073．05 Spatio—temporalExpressedAnalysisofTwoKindsofChemicalCommunication RelatedProteinsinW orkingBeeofApisceranacerana LIHong—liang1,2WANGHai—yan2,GAOQi-kang ．CHENGJia—an rJ．CollegeofLifeScience，ChinaJiliangUniversity,Hangzhou310018,China； 2．InstituteofInsectSciences，Zh~iangUnive~ity,Hangzhou31oo2~China) ^ sI tThespatio—temporalexpressedprofilesoftwokindsofchemicalcommunicationrelatedtogenesofApisceranacerana proteins，odorant—bindingproteinofAc—ASP2andchemosensoryproteinofAc-ASP3，wereidentifiedbyReal-timePCR．Usingthe method0f2 ，theresultswiththemethodof2 。showedthatAc-ASP2wasagenecodingantennaspecificprotein，whichdidnot expressinlarvaandpupa，buthaddiscontinuoushJghabundanceperiods：1，9，15，27 and30d，theexpressnigabundanceatsuchpe— riodswastenfoldhigherthanthatatotherperiods．From thedistributionofAc-ASP3mRNA indifferentissues，thetranscriptamounts seemedtobehigherinwings，abdomenandthorax (about10 orderofmagniutde)，andlowerinlegs，antennaeandhead (about10 orderofmagniutde)，theoriginalcopynumberwas：wingsabdomenthoraxlegsantennaehead．Theresultsaboveshowedthat Ac-ASP3hadintimaterelationwithchemosensorybehaviorofwingsandabdomeni