人髂动脉粥样硬化斑端粒酶活性检测 - 中国病理生理杂志.pdf

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2017-08-11 发布于天津
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人髂动脉粥样硬化斑端粒酶活性检测 - 中国病理生理杂志

Chin s Journal of Pathophysiology 2003, 19( 6) : 745- 747 ∀ 745 ∀ [ ] 1000- 4718( 2003) 06- 0745- 03 * 1 2 1 3 1 1 屈艺 , 黄翔, 王正荣, 彭晓东, 刘菽秋 , 刘柏林 ( 1, 2 , 3 , 61004 1) [ ] : : 20 5 , , (T lom ric r p at s qu nc amplification protocol, TRAP) : 5 , 20 , 8 , 12 : , [ ] ; ; ; , , [ ] R363 [ ] A stain FML Bioproducts coomassi prot in assay r ag nt Pi c Taq [ 1] Zhu , PE 2 PBS 2 , , , 10% , , , - , ( vascular smooth muscl c ll, VSMC) 3 , 20 mg VSMC , , , , [ 10 mmol/ L HEPES - KOH ( pH7. 5) , 1. 5 [2] [3] , Bonin Minamino mmol/ L MgCl , 10 mmol/ L KCl, 1 mmol/ LDTT) , 2 , VSMC , 150 mL , , , CHAP- Lysis buff r, , VSMC 30 min, 14 000 g 4 ! 20 min, , cooamassi prot in assay r ag nt , , 595 mm , 2 g/ L, - 70 ! Kim[ 8] ( t lom ric r p at s qu nc amplification protocol, TRAP) , 1 20 , 2 g , , ,TS Prim r, prim r mix, NTP, PCR grad 5 wat r 2U Taq 50 L, 25 ! 30 min, PCR , 94 ! , 30 s; 50 ! 30 R TM ( ) oncor TRAPEZE s; 72 ! , 90 s 35 , 72 ! 10 min oncog n , SYBRGr n nucl ic acid g l H La , [ ] 2002- 03- 22 [ ] 2002- 05- 28 Rnas ( 1 g/L) 37 ! 20 min * [ ] ( No. 40 L PCR 12% E- mail