薄层色谱法测定纸张水解液中单糖的研究.pdfVIP

第l6卷第2期 纤 维 素 科 学 与 技 术 、bl_l6 No．2 2008年6月 Journal of Cellulose Science and Technology Jun．2008 文章编号：1004-8405(2008)02．0043．06 薄层色谱法测定纸张水解液中单糖的研究 李继民1， 王彦吉2， 邹 宁1， 姚丽娟 (1．中国刑警学院 法医系，辽宁 沈阳 110035； 2．中国人民公安大学 刑事技术系，北京 100038) 摘 要：采用薄层色谱法测定了纸张样品水解液中的单糖组成。以硅胶G为固体吸 附剂，以体积比为正丁醇：乙酸乙酯：异丙醇 ：乙酸 ：吡啶：水=7：20：12：7： 6：5的混合溶剂为展开剂，以苯胺一草酸为显色剂，测定了单糖的比移值 (Rf)， 并对纸张样品水解液中的单糖进行了定量分析。 关键词：纸张；单糖；薄层色谱法 中图分类号：TS761；Q532 文献标识码：A 纸张中的主要成分为纤维素和半纤维素。纸张水解后，在水解液中同时含有木糖、阿拉 伯糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖等单糖。目前分离测定单糖的方法主要有高效液相色谱法【¨、 气相色谱法 、薄层色谱法 引。采用气相色谱法，遇到的主要困难是糖本身没有足够的挥 发性，所以必须在气相色谱分析之前预先转化成易挥发、对热稳定的衍生物。另外由于糖的 异构化，致使色谱峰分析时每种糖产生几个峰，这往往影响组分的分离和定量。高效液相色 谱具有分离速度快、分辨率高、分离效果好、重现性好、不破坏样品等优点，但糖类本身没 有紫外吸收，只能采用示差折光检测器( )或蒸发光散射检测器 (ELSD)检测。 分辨 率低，而ELSP虽然效果好，但目前价格昂贵。另外，采用HPLC分析时，色谱柱的选择也 比较困难，一般采用氨基柱但分离效果欠佳，而专用的糖柱又十分昂贵。为了找到一种常规 实验室即可快速分析单糖组成的方法，我们摸索了薄层色谱法 (TLC)的分离与测定条件， 并对纸张水解液中的还原糖进行了测定，该方法试验设备简单、成本低、操作简便、所需时 间短、方法重现性好，适应于公安基层办案工作的需要。 1 实 验 1．1 仪器、试剂与样品 仪器：101．2B型电热烘干箱 (江苏海门实验仪器厂)；玻璃展开缸。 试剂：葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖、正丁醇、乙酸乙酯、异丙醇、乙酸、 吡啶、丙酮、硫酸、氢氧化钠、苯胺、草酸等，均为分析纯。 样品：纸样l为金旗舰牌复印纸(金光集团亚龙纸制品)；纸样2为威尔牌复印纸 (太 阳纸业，枫叶纸业有限公司) 收稿日期：2007．06．07 作者简介：李继民 (1970～)，男，副教授；主要研究方向：案件纸张的检验。 纤 维 紊 科 学 与 技 术 第l6卷 1．2 实验方法 1．2．1 试剂的配制 标准液：分别称取葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖各0．1 g，分别溶于少量 蒸馏水中，并定容于100 mL容量瓶中，摇匀备用，得五种单糖的标准液。各单糖的质量浓 度为l g／L。 混合单糖标准液：分别称取葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖各0．1 g，共溶 于少量蒸馏水中，并定容于100 mL容量瓶中，摇匀备用。各单糖在混合单糖标准液中的质 量浓度为l g／L。 展开剂系统I：正丁醇：乙酸乙酯：异丙醇：乙酸：吡啶：水=7：20：12：7：6：5(体 积比)。 展开剂系统II：正丁醇：丙酮：水一4：3：1(体积比)。 展开剂系统Ⅲ：乙酸乙酯：吡啶：无水乙醇：水=8：l：l：2(体积比)。 显色剂：苯胺一草酸溶液，0．93 g苯胺和l。66 g草酸溶于被水饱和的100 mL正丁醇中。 1．2．2 薄层板的制备 薄层用玻璃板规格为20 em~15 em，在涂布前，将玻璃板用水洗净并干燥，再用浸有 乙醇的脱脂棉擦净，玻璃板上不得有油痕，否则在展开时薄层容易脱落。本法采用加黏合剂 的板，先取硅胶G(60型)20 g置于玻璃研钵中，将170 mL蒸馏水分两次加入，第一次加