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小鼠体细胞核移植重构胚中γ-微管蛋白的动态变化 - 生理学报
158 生理学报Acta Physiologica Sinica , April 25, 2013, 65(2): 158–164
研究论文
γ-
小鼠体细胞核移植重构胚中 微管蛋白的动态变化
1 2,*
张庆华 ,雷蕾
1 157005 2
牡丹江市第二人民医院病理科,牡丹江 ;哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室,胚胎与干细胞工程重点实验室,
哈尔滨 150081
(somatic cell nuclear transfer, SCNT) γ-
摘 要:本文旨在研究小鼠体细胞核移植 重构胚中 微管蛋白的动态变化。采用免疫荧光
化学染色与激光共聚焦显微镜观察的方法,对去核前后第二次减数分裂中期(metaphase II of meiosis, MII) 的卵母细胞和核移
γ- γ- MII γ-
植后的重构胚进行 微管蛋白的定位观察,分析 微管蛋白的作用。结果显示, 期卵母细胞去核后, 微管蛋白主要分
γ-
布于皮层;卵母细胞激活后随着胞质星体的逐渐增多,皮层 微管蛋白明显减少,但没有新的纺锤体形成。卵丘细胞注入去
MII SrCl γ-
核 期卵母细胞后,经 2激活能形成一个纺锤体,在分裂前期,斑点状的 微管蛋白散布在染色体之间;在分裂中期,
γ- γ-
微管蛋白沿着纺锤体分布或聚集于纺锤体两极;在分裂后期或末期, 微管蛋白迁移到分开的染色单体之间。部分重构胚
γ- MII
发生提前激活,形成异常纺锤体,主要表现在 微管蛋白和染色体分布异常。卵丘细胞注入未去核的 期卵母细胞后,经
SrCl γ-
2激活后能形成两个纺锤体, 微管蛋白的分布与正常核移植相类似。同样,部分卵母细胞发生提前激活,形成两个小
γ- SCNT
梭形纺锤体或一个宽而大的桶状纺锤体。以上结果提示,供体细胞核内的 微管蛋白在 重构胚纺锤体组装过程中发挥
SCNT γ-
着关键作用; 重构胚易被提前激活形成异常纺锤体, 微管蛋白的异常与染色体分布失常和纺锤体结构异常密切相关。
γ-
关键词: 微管蛋白;核移植;有丝分裂;小鼠
中图分类号:R329.2+4
Dynamic changes of γ-tubulin in mouse somatic cell nuclear transferred
em
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