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绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达 - 华中农业大学学报
第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报
34 2 Vol.34 No.2
年 月 ,
2015 3 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Mar.201586~90
g g y
绵羊痘病毒多表位基因的构建及原核表达
陈轶霞 王明明 龙 玲 邵忠伟 刘俊林
,
西北民族大学生命科学与工程学院 兰州 730124
摘要 通过计算机软件筛选出绵羊痘病毒基因组中心编码区的 核蛋 白、 融合蛋 白、
ORF90 ORF112
、 、 ,
糖蛋白 膜蛋白和基因组末端的 宿主范围相关基因的 段 细胞优势抗原表位 以
ORF117 ORF55 ORF134 6 T B
( ) , ,
柔性氨基酸 作为接头 串联合成 条全新的多表位嵌合基因 将其克隆到原核表达载体
GPGPG 1 mE pET-32
, , ;
中 采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒 构建 pET32-mE质粒 用 IPTG在不同条件下诱导表
, , 。 , 。
达 确定最佳表达条件 表达产物经 SDS分析 结果表明 重组蛋白是分子质量为 41ku的融合蛋白 在
/ , 、 , 。
IPTG浓度为 0.5mmolL温度为 37℃ 诱导 4h时目的蛋白的表达量最大 约占菌体的 32% Westernblot
- -
, 。
ting试验表明 目的蛋白可被羊痘血清识别
; ; ; ;
关键词 绵羊痘病毒 抗原表位 多表位 嵌合基因 原核表达
中图分类号 + 文献标识码 文章编号 ( )
S852.654 A 1000-2421201502-0086-05
羊痘病毒( , 主要激发细胞免疫, 和
shee oxvirusand oatoxvirus ORF134 ORF117 ORF134
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