R2基因扩增FISH 典型特殊案例分享.pptx

HER2基因扩增FISH 典型特殊案例分享;声明 本幻灯片仅以学术交流为目的。处方请参考国家食品药品监督管理总局批准的药品说明书。;背 景;HER2 检测标准流程;FISH 评判标准;FISH 评判标准;FISH 评判标准;Note;CASE 1;A，图中显示的是两组独立的肿瘤细胞群（由虚线隔开）； 一组明显无扩增现象，表明HER2基因的缺失（黄色箭头所示）， 另外一组的HER2/CEP17比率值﹥2.2，表现为基因扩增（白色箭头所示）。;病例1： 简单的异质性扩增在该病例中，来自同一组织的肿瘤细胞，于肿瘤组织切片内，肿瘤细胞可能会立即紧挨放置或在各自的肿瘤区域内。一组很明显无扩增现象，另一组的HER2/CEP17比值大于2.2，明显说明基因扩增。;至少计算每区域中的20个肿瘤细胞;CASE 2;B，HER2基因和CEP17拷贝数都有所增加，扩增（HER2/CEP17比率值﹥2.2，白色箭头所示）和非扩增细胞看起来混合在一起，分散在肿瘤区域。有些细胞的比率正常，有些扩增明显，但是不可能将两个分开的区域区分开来。;病例2： 复杂的异质性扩增“混合”的扩增和非扩增肿瘤细胞在该病例中，扩增和非扩增细胞看起来混合在一起，并分撒在肿瘤区域内。有些细胞看起来正常，一些明显扩增，但是无法区别两个不同的区域。;计数3个区域的60个细胞，并在一张报告单上分别记录扩增和非扩增细胞数目。;CASE 3;C，在非扩增细胞占主导地位的背景下，我们可以看到一个孤立的扩增细胞（白色箭头所示），扩增水平较高（比率值﹥3.0）。;病例3：孤立扩增的癌细胞 在该病例中，在非扩增细胞占肿瘤组织主导地位的大背景下，出现比率值明显较大（比值﹥3.0）的孤立细胞。值得注意的是，扩增细胞中的信号显而易见，真实可靠，没有人为处理的痕迹。 也许可以逼真地人为模仿一些信号，但多波长的荧光信号（即自荧光）则难以模仿。因此，对之评价前，应该确保这些信号在4，6 - 二脒-2 - 苯基吲哚示踪剂下或液体过滤器下不显绿色。如果这些信号是真的，就应该计数。;只有在细胞明显扩增的情况下才能记录孤立扩增癌细胞的存在。该类细胞的预后价值尚不明确，但是当下的证据表明， 百分比较小（30%）的情况下，其对结果没有影响。列出所有计数细胞的HER2/CEP17比值平均值，并根据该值进行全面的诊断（扩增或非扩增）。例如，在该病例中，HER2基因为非扩增。;CASE 4;A和B ，肿瘤细胞都只带有HER2和CEP17的信号，暗示整条17号染色体区域的完全缺失。;病例4：整条17号染色体的缺失 在该病例中，在整个肿瘤细胞视野范围内仅可观察到HER2和染色体17CEP信号；实际上，看起来每个细胞都缺失一块整条17号染色体的区域。仔细检查发现，相毗邻的正常细胞仍有1到2个CEP17和HER2信号。17号染色体CEP的拷贝数目平均值为1.02（标准差，0.13），HER2基因的拷贝数目平均值为1.06（标准差，0.25）；HER2/CEP 17比值为1.05.;根据英国相关指南进行评分。;CASE 5;C 和D，显示的是肿瘤细胞中，HER2拷贝数正常，而17号染色体CEP信号缺失的现象。结果为临界的HER2基因扩增。;病例5 在该病例中，肿瘤细胞缺失17号染色体CEP信号（又可看到毗邻的正常细胞呈现正常的信号模式）。HER2拷贝数正常，仅可观察到17号染色体CEP17信号的缺失。 结果是，HER2基因扩增与否不大明确，HER2拷贝数目平均值为1.98（标准差，0.62），CEP17拷贝数的平均值为1.02（标准差，0.13）；HER2/CEP17 比值为1.95。 计数的60个细胞中，该病例可称之为“临界但非扩增”现象，根据美国临床肿瘤学协会/美国病理学家研究院指南，该病例可称之为不确定。如果60个细胞中，有6个（10%）及以上细胞的HER2/CEP17比值为2.20，即使每个细胞中HER2拷贝数平均值小于2，根据美国病理学家研究院指南，也将之视为呈现异质性HER2基因扩增现象。 然而，相关研究结果显示，HER2/CEP17比值为2.2及以上的细胞数高达30%时，对结果没有影响;从HER2/CEP17比值来看，该病例为非扩增肿瘤。HER2复制水平低下，是否出现如例4所示的整条17号染色体缺失，尚不明确 一条染色体上带有CEP17α~卫星的特定着丝粒区域缺失与否也有待查明。很可能这是染色体重排和失衡的结果。其它可能性（也可见于细胞遗传学中的其它实体瘤）包括1条17号染色体的缺失（17号染色体长臂上一个等臂染色体的形成）和不平衡置换（保留包含17q物质和HER2核心的衍生染色体） 低水平“扩增”的小百分比(30%)细胞的存在，没有显著性差异，不予以报告。呈现17号单倍体的病例对曲妥珠单抗的反应性较差。