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第2单元 免疫沉淀类实验
基本原理 散射比浊法是指沿水平轴向反应液照射一定波长的光,当光线通过反应体系时,由于抗原抗体反应形成的免疫复合物微粒子对光发生折射、反射及透射,使水平方向的光发生偏转,产生散射光。光线偏转的角度与发射光的波长和反应液中抗原抗体复合物颗粒的大小及多少密切相关。一般仪器采用不同波长的光源两套光路,分别在90°和180°散射角检测小、中和大分子物质。 所谓速率是指在单位时间内,抗原抗体反应形成复合物的速度。速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的最快时间段的散射信号值,当抗体量大于抗原量时,形成的免疫复合物为小分子不溶性颗粒,产生的散射信号最强,形成的速率散射信号值也最大。 免疫浊度分析系统基本技术流程图 开机 依次打开主机电源、电脑及打印机开关,仪器自行启动, 完成初始化和自检,即可开始工作 参数设置 试剂装载 校准 标本装载 标本测定 结果查询与传送 结果报告 设置仪器项目和单位等相关参数 将试剂盒放入试剂舱内,根据已定程序扫描相关信息 按已设定的参数和程序进行校准 将标本放入标本架,根据已定程序输入工作单 按已设定的参数和程序进行测定 按已设定的参数和程序查看并传送结果 以标准模式报告结果并给予解读和对临床提供建议 仪器示意图 ① 试剂区 ② 试剂针 ③ 样本区和稀释液 ④ 加样针 ⑤ 反应区 ⑥ 清洗工作站 1 2 4 3 6 5 1 2 4 3 6 5 检测菜单(举例介绍,并不包含全部) 自身免疫性疾病 免疫球蛋白A (IGA) 免疫球蛋白G (IGG) 免疫球蛋白M (IGM) 补体C3 (C3) 补体C4 (C4) ?轻链(KAP) ?轻链(LAM) Free ?轻链* Free ?轻链* C-反应蛋白(CRP) 触珠蛋白(HPT) 备解素B因子(PFB) 类风湿因子(RF) 炎症状态监测 白蛋白(ALB) ?-酸性糖蛋白(AAG) 抗胰蛋白酶(AAT) 铜蓝蛋白(CER) C-反应蛋白(CRP) 触珠蛋白(HPT) 类风湿性关节炎 类风湿因子(RF) C-反应蛋白(CRP) 抗链球菌溶血素O(ASO) ADNase-B 肾功能监测 尿微白蛋白(MA) 尿免疫球蛋白(IGU) 尿转铁蛋白(TRU) ?1?微球蛋白(A1M) ?2?巨球蛋白(AMG) ?2 ?微球蛋白* 胱抑素C* 传染病 抗DNA酶B(DNB) 抗链球菌溶血素O(ASO) ?2 ?微球蛋白* 贫血 抗凝血酶III (AT3) 铁蛋白(FER) 转铁蛋白(TRF) 触珠蛋白(HPT) 免疫功能障碍评估 免疫球蛋白A (IGA) 免疫球蛋白E (IGE) 免疫球蛋白G (IGG) 免疫球蛋白M (IGM) IgG1亚型* IgG2亚型* IgG3亚型* IgG4亚型* ?轻链(KAP) ?轻链(LAM) 补体C3 (C3) 补体C4 (C4) C-反应蛋白(CRP) 超敏CRP (CRPH) 肝脏疾病 抗胰蛋白酶(AAT) 抗凝血酶III (AT3) 铜蓝蛋白(CER) 补体C3(C3) 补体C4(C4) 免疫球蛋白A(IGA) 免疫球蛋白M(IGM) 尿转铁蛋白(TRU) 前白蛋白(PAB) 适合抗原抗体反应的特性 是检测技术的必威体育精装版发展 配套有专业系统检测 符合检测项目在临床应用 灵敏度高 稳定快速 线形范围宽 易于自动化 无放射性污染 速率法的动态分析,准确度高, 速度快, 干扰少, 实测的抗原过量监测真正解决了钩状效应的影响, 排除假阴性结果. 专门的自动化仪器保证了检测过程的方便, 快速和高效. 原装的试剂和质控保证了检测结果的准确,稳定和可靠. 准确可靠 简便快速 成本低 速率散射比浊法检测的优点 结合见习实验室的免疫浊度分析系统,叙述免疫比浊分析仪的检测原理。 结合见习实验室的免疫浊度分析系统,简述免疫浊度分析系统的操作程序、影响免疫浊度分析的因素和克服影响因素的措施。 免疫比浊分析仪可以检测哪些项目?有何临床意义? 见习报告 北华大学 王雪松 * 第二单元 免疫沉淀实验 实验一 双向免疫扩散试验 在琼脂凝胶中,待检人血清IgG和羊抗人IgG抗血清在不同孔内各自向四周扩散,在比例恰当处形成肉眼可见的白色沉淀线,证明两者发生特异性结合反应。 实验原理 试剂 健康人血清,用生理盐水做1:5~1:40系列倍比稀释 、羊抗 人IgG抗血清、10~15g/L琼脂糖或琼脂粉 。 仪器 水浴箱、温箱 。 材料 载玻片、微量加样器、打孔器、5ml吸管、吸球、湿盒等 。 实验器材和材料 制备琼脂凝胶:用生理盐水配置10~15g/L琼脂,隔水加热煮沸备用。 浇板:将载玻片置于水平台上,用吸管吸取4~4.5ml融化的琼脂倾注于玻片上,滴加时
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