李会军《生药学》3-生药的有效性评价.pptVIP

HPLC变动因素有： GC变动因素有： TLC变动因素有： 1 2 Diamonsil-C18 (5μm, 4.6mm×250mm) 不同色谱柱 Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18 (5μm, 4.6mm×250mm) 不同色谱柱 Agilent 6890N型气相色谱仪 （三）气相色谱法（Gas chromatography, GC） 1、GC仪 载气：H2、N2、 He 进样系统：溶液直接进样或顶空进样 色谱柱：弹性石英毛细管柱 柱温箱 ：恒温和程序升温 检测器 ： 2、GC仪组成 弹性石英毛细管柱 不锈钢填充柱 涂壁毛细管柱 载体涂层毛细管柱 2、GC仪组成 色谱柱 检测器 火焰离子化检测器(flame ionization detector , FID) 热导检测器(thermal conductivity detector, TCD) 氮磷检测器(nitrogen-phosphorus detector, NPD) 火焰光度检测器(flame photometric detector , FPD) 电子捕获检测器(electron capture detector , ECD) 质谱检测器(mass spectrometric detector, MSD) 2、GC仪组成 3、GC定性方法 两个定性参数:tR值、MS 4、GC定量方法 内标校正因子法 外标法 面积归一化法 标准溶液加入法 《中国药典》(2010年版)气相色谱法用于中药分析的品种有50余种。 5、GC法的应用 Pogostemon cablin中patchouli alcohol、pogostone的测定 高效毛细管电泳 (high performance capillary electrophoresis, HPCE) 毛细管电色谱 (capillary electrochromatography，CEC） 液相色谱与核磁共振联用 (LC-NMR) LC/NMR/MS （四）其他色谱法（Miscellaneous chromatography） HPCE HPLC-MS 三、定量分析方法的方法学验证(Validation of the analytical method) 目的：证明采用的分析方法适合于相应检 测要求。 方法验证用于： 建立新的分析方法时 原分析方法进行修订时 (一)验证内容 线性及范围（linearity and range ） 准确度(accuracy) 专属性（specificity） 精密度（precision） 重复性（repeatability） 重现性（reproducibility） 检测限及定量限（limit of detection and quantification） 耐用性 (robustness) 1、线性（linearity）和范围（range ） 线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。 范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 (二)实验设计 线性（linearity）和范围（range ） Verticine 8.1 Y=0.0945X-0.0437 0.998 1.0-27.4 Analytes tR Calibration curve r2 test range mg/ml Verticinone 9.1 Y=0.1006X-0.1036 0.998 0.9-23.7 线性（linearity）和范围（range ） 2、准确度(accuracy) 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(％)表示 ； 回收率% =（实测值-供试品所含被测成分量）/加入对照品量 对照品 药材量 （g） 药材中对照品含量(mg) 加入量 (mg) 测得总量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) ? 贝母素乙 1.0055 0.6787 0.6640 1.3253 97.4 100.4 2.94 1.0004 0.6753 0.6640 1.3439 1.0002 0.6751 0.6640 1.3574 1.0005 0.6753 0.6640 1.3389 1.0006 0.6754 0.6640 1.3204 9