ELISA检测GFAP的临床意义.docVIP

　　ELISA检测GFAP的临床意义 高元元 牛国平 徐州市中心医院检验科，江苏徐州 221000 [摘要] 目的 探讨出血性脑卒中和缺血性脑卒中患者血清中胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达以及对预后的影响。方法 用ELISA方法检测出血性脑卒中和缺血性脑卒中患者和健康对照组外周中GFAP的表达水平，统计分析GFAP表达与脑卒中的进展及预后的关系。结果 出血性脑卒中患者外周血GFAP表达水平显著高于缺血性脑卒中患者和正常对照组，差异有统计学意义 (Plt;0.05)。 结论 出血性脑卒中患者外周血GFAP表达水平高于缺血性脑卒中患者和正常对照组，且预后更差。 .jyqkL，用3 000 r/min离心进行15 min，让血清分离，在-80 ℃的冰箱中保存以待检测。采用瑞士奥斯邦酶免之星全自动酶免分析仪。 1．3 方法 ELISA检测血浆GFAP水平。脑卒中患者入院后立即采集外周血，正常对照组为健康体检时抽取5 mL静脉血，血液标本置于抗凝管中，在室温下，3 000 r/min离心15 min，取血浆置-80 ℃保存待检。采用ELISA检测血浆GFAP浓度，用伯乐酶标仪BIO-RAD Model 680检测样品的吸光度值，并参照试剂盒说明书计算出血浆胶原纤维酸性蛋白标准曲线和浓度，结果以ng/L表示。 1.4 统计方法 采用SPSS 16.0软件对数据进行相关分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，进行t检验。 2 结果 2.1 缺血性脑卒中患者和出血性脑卒中患者GFAP表达相关性分析 出血性脑卒中患者外周血GFAP表达明显高于缺血性脑卒中组，同时大量出血组明显高于少量出血组，且高于正常对照组，见表1。 2.2 GFAP水平与出血量关系 影像学显示出血量越大，血肿体积越大，血清GFAP的水平越高（52.35±5.06）ng/L，比少量出血组的（41.10±7.02）ng/L高，差异有统计学意义（Plt;0.05），用Speman等级进行相关分析，出血性脑卒中患者的出血量与外周血GFAP水平成正相关，差异有统计学意义（r=0.912 3，Plt;0.01） 3 讨论 目前，临床上脑卒中的诊断主要依靠医师的临床检查和影像学技术(CT 或MRI)进一步地证实。目前，GFAP作为脑卒中的生物标志物的研究有很大进展，这在急诊环境中对于脑卒中的诊断、分型或甚至预后有重要的价值。 GFAP是一类酸性蛋白，其分子量在50~52 kDa之间。GFAP作为直径8~10 μm的星形胶质细胞的中间丝，存在于细胞质和核周之间，是星形胶质细胞的特异性分子标记物之一，对神经元起支持和营养作用。GFAP不仅明显的影响神经系统功能的康复、突起的再生和受损神经元的存活，而且对于星形细胞对损伤的反应程度有决定性作用。如果中枢神经系统受损，会使得突起增长且增多、细胞体积增大以及星形细胞的活化增加，GFAP的合成速度大大提高，因此GFAP的含量增加，是判断星形胶质细胞激活的主要标准，还可以在一定程度上判断脑损伤的程度[5～7]。通过临床研究知道，脑梗死患者在发病6 h后，GFAP在血清中的含量增加[8]，2～6 d时，达到最高值，脑梗死体积和神经缺失症状也与GFAP水平是正相关的，而且还可以判断瘫痪肢体神经功能在3个月后的恢复情况[9]。此外，也有研究表明GFAP作为星形细胞的特异性蛋白，在急性脑损伤时均有异常表达，细胞破坏后其大量释放，它们在外周血中的升高程度与多种急性脑损伤疾病严重程度及预后密切相关，目前被认为是判定脑损伤严重水平的实验室标准[10]。 通过临床研究可知，出血性脑卒中患者在发病后，GFAP在血清中的含量明显增加，且患者的症状和GFAP水平明显相关，且与预后密切相关；缺血性脑卒中组患者的血清GFAP水平升高，但没有出血性脑卒中组升高显著，与之相对应的是出血性脑卒中组的预后和后遗症情况较缺血性脑卒中组更为严重，原因可能与出血性脑卒中组神经元坏死和脑水肿更为严重，增大了星形胶质细胞的活性，引起星形胶质细胞坏死，大大增加了血脑屏障通透性，从而明显的提高了GFAP在血浆中的含量。所以，对于脑卒中患者，应该检查其GFAP在血清中的变化情况，不单单是有利于急性期脑损伤程度的判断，还可以很好的评估脑卒中的预后。此外，有报道称动脉瘤性蛛网膜下腔出血后，血浆GFAP浓度明显升高，与蛛网膜下腔出血后神经元坏死及神经功能预后不良显著相关[11]。也有报道称，脑外伤后，血浆GFAP水平显著升高[2]，明显高于健康人群。 GFAP作为诊治脑卒中的重要实验室指标具有较高的敏感性和特异性，有助于鉴别缺血性脑卒中和出血性脑卒中[12]；脑梗塞后能早期释放且稳定，可迅速定量测定而且价廉，有