107动物细胞工程.ppt

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107动物细胞工程

动物细胞工程 * * 1、组织培养中细胞分裂素与生长素比值高时诱导 A?.根的分化? B?.芽的分化? C?.茎的分化? D?.芽的休眠 复习巩固 《教材完全解读》P45 B 2、写出植物组织培养的过程: 外植体 ( ) ( ) 胚状体 或丛芽 植物体 一、动物细胞培养 1、过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 (分解弹性纤维) 思考 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处? 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 动物细胞培养的条件 1.无毒、无菌的环境: 通常要添加一定量的抗生素 2.营养: 需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3.温度和PH值: 多数细胞生存的适宜PH为7.2-7.4 4.气体环境: 需要O2和CO2,主要作用是维持培养液的PH。通常将培养瓶放在含95%空气加5%的CO2的混合气体中培养 动物细胞培养技术的应用 1、获得细胞产物,如蛋白质生物制品-病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等 2、获得烧伤病人植皮所需的细胞 3、获得细胞用于检测有毒物质 动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞 二、动物体细胞核移植技术与克隆动物 克隆羊培育过程 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而逐渐受抑制,分化潜能逐渐变弱 克隆 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最终发育为动物个体 胚胎移植技术 试管动物(婴儿)培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 (移植) 新个体 母体子宫内 孕育、产出 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振动、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后 诱导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 三、动物细胞融合与单克隆抗体 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 物理法 化学法 灭活的病毒 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 灭活病毒? 诱导融合的原理?

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