组织标本的处理.ppt

病理切片 病理标本的一种。 制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，作出病理诊断，为临床诊断和治疗提供帮助。  病理诊断的应用 通过活体组织检查、脱落和细针穿刺细胞学检查以及尸体剖检，应用形态学的观察方法，并结合临床医学各个分科以及组织化学、免疫组织化学、分子生物学、超微结构和各种形态定量研究等知识和手段，为临床最终提供可靠的诊断依据 ，确定疾病的性质，查明死亡原因。 与其他诊断手段如B超、常规放射、CT、MRI及同位素相比，目前世界各国医学界公认最可信赖、重复性最强、准确性最高的仍然是病理诊断，因为病理诊断报告是明确的疾病名称，临床医师主要根据病理报告决定治疗原则、估计预后以及解释临床症状和明确死亡原因。 病理切片 制作切片的主要过程有：（1）取材 （2）固定 （3）脱水 （4）包埋 （5）切片 （6）染色 （7）封固。 动物致死法 麻醉法 可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或玻璃瓶内进行麻醉。也可用4%戊巴比妥做静脉注射，剂量一般按动物体重每公斤1ml；或用20%氨基酸乙酯（尿烷或乌拉坦）作腹腔注射，剂量一般按动物每kg5ml。适用于鼠等小动物。 空气栓塞法 如兔可用50ml注射器将空气有耳静脉推入，使动物很快死亡。一般适用于大动物，如兔、犬、猫等动物。 动物致死法 击头法 如大、小鼠等小动物，可用重物猛击后头部或将其头后部猛撞桌沿，最好一击而死。 断头法 青蛙、小鼠等小动物可用剪刀剪去其头部，如反射尚未消失，则可用探针插入椎管中，破坏脊髓。较大动物如兔等，可用斧头迅速砍头致死。 股动脉放血法 动物经吸收乙醚或氯仿稍麻醉后，立即切开股动脉放血。 注意事项 上述各法，应根据制片需要选用，如空气栓塞法不宜用于血管注射标本的制作；乙醚麻醉对丘脑下部神经分泌物的染色标本不利；股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。 无论何种致死法，都要求动作迅速，因为动物一旦死亡，其组织与细胞即开始自溶。 组织学检查，特别是细胞学观察，要求材料新鲜。 怎样取材？ 取材工具：取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，不应使用有钩镊子或血管钳等手术器械镊取标本，以免损害组织造成人为组织变化，给诊断带来困难或导致错诊，漏诊。 怎样取材？ 标本的选取：应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常组织交界处。切取标本的原则是求准而不是求量多，所以切取组织宜小不宜大，以不超过24x24mm2为佳，厚度以3—5mm为度，过大过厚会影响对标本的固定，另一方面也影响切片的制作。 特殊目的者应属例外。 常规活检标本的取材 注意病变的部位、形状、大小、颜色以及与周围组织的界限，有无完整的包膜。取材时应取病变部位、病变的边缘、病变与正常组织交界处以及远离病灶的正常组织。 材料新鲜 最好是动物的心脏还在跳动时取材，立即投入固定液内。例如：脏器的上皮组织最易变质，应争取在半小时内处理完毕，否则免疫组化染色时会产生背景染色。 小标本的活检取材 常见为宫颈、宫内膜、鼻咽、口腔、喉以及各种内窥镜所取得的组织。它们体积小，因此取材时要用擦镜纸包起来再进行固定、脱水，特别是由胃镜、肠镜等所取的组织，取材时一定要滴上伊红，以防止丢失。 活检组织多用活检钳夹取。 尸体解剖的取材 尸体解剖的取材应根据实际需要进行，一般取材部位和数量如下： 1 心和大血管 左心室一块，右心室一块，主动脉一块，取材部位可在距主动脉瓣5cm处。 2 肺 右下叶一块，切成正方形；左下叶一块，可切成长方形。 3 肝 右叶一块，切成正方形；左叶一块，切成长方形。 4 肾 两肾各一块，包括皮质、髓质和肾盂。 5 脾、胰、膀胱、胸腺 、睾丸或卵巢 各一块 6 肾上腺 右、右各一块 7 消化道 食管一块，胃窦部一块，小肠一块，淋巴结一块，直肠一块 8 子宫 宫颈和宫体数块 9 脑 左侧运动区一块，左侧豆状核一块，小脑一块 10 脑下垂体 一块，前叶或包括前后叶 取材注意事项 取材时对大体标本（肉眼标本）绘制图象，进行仔细描述。包括形状、大小，硬度，颜色，病灶（或可疑病变）部位等。对所取的组织应定位编号。 切取镜检组织块后，可将剩余的组织放入70%洒精中保存，这样有利于日后再取材切片时的细胞染色。 取材注意事项 勿使组织块受挤压 切取组织块用得刀剪要锋利，切割是不可来回挫动。夹取组织时，切勿猛压，以免挤压损伤组织、细胞。取材时，组织块可稍取大一点，以便在固定后，将组织块的挤压或损伤部位修去。 尽量保持组织的原有形态 新鲜组织经固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形；神经、肌肉组织等，则可将其两端用线