一轮复习:选修1生物技术实践模块.ppt

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一轮复习:选修1生物技术实践模块

考纲解读;一、微生物的实验室培养;2、理解培养基的种类及应用(适当补充);加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色葡萄球菌 只有尿素作为惟一氮源的培养基 分离出分解尿素的细菌 不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 只有纤维素作为惟一碳源的培养基 分离分解纤维素的细菌 加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞;(二)无菌技术;消毒 ; 二、实 验 操 作;基本过程:称量→溶化→灭菌→倒平板;肋秒初肖佐锗肆邑尿邯壮舀未猛塞鉴苞社耗咎憾偏碑租眉佬岛党腥濒懒粒一轮复习:选修1生物技术实践模块一轮复习:选修1生物技术实践模块;取舒酞疆渺验涉糙歌准祈湘惺疹轿缠显茫酶芭止袄撩僻旧瘦粳码各蘸缎小一轮复习:选修1生物技术实践模块一轮复习:选修1生物技术实践模块;倒平板操作的讨论; 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。;(二)纯化大肠杆菌; 1、为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环?; 2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 以免接种环温度太高,杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。; 2.稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法操作过程分两个步骤,即系列稀释操作和涂布平板操作。;系列稀释操作;涂布平板操作;涂布平板操作讨论; 三、结果分析与评价; 3.培养12h和24h后,观察到的实验结果相同吗?如果不同,请分析产生差异的原因? 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长,使菌落不断增大。;四、课题延伸—菌种的保存;土壤中分解尿素的细菌的分离与计数; 1.在培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是是什么物质?;(二) 统计菌落数目; 第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因此结果不具有说服力。第二位同学设置了重复组,涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另 2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重 复组,才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否基本一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。;(三) 设 置 对 照;一、实 验 设 计 ;实验设计; 准备牛肉膏蛋白胨培养基(作为对照组)和选择培养基。将菌液稀释相同的倍数(见教材23页“样品稀释流程示意图”)。稀释倍数为 103 ~107。每个稀释度均用3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基,共需要15个选择培养基,5个牛肉膏蛋白胨培养基(都作好标记)。; 将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(锥形瓶体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液1mL,转移至盛有9 mL的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板。; 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中,观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。;二、结果分析与评价 ; 2.样品的稀释操作是否成功;三、课 题 延 伸 ;分解纤维素的微生物的分离;①取二支20mL的试管;刚果红染色法;一、实 验 设 计;阅读与思考;土壤中纤维素分解菌的分离; 2.选择培养?:选择培养需要的仪器有:250 mL锥形瓶、无菌称量瓶、药匙、1 mL和10 mL的移液管、天平、摇床、温度计等。 在250 mL锥形瓶中装入30 mL选择培养基,用8层纱布做成瓶塞,将瓶口塞紧,再在瓶塞外包裹两层包装纸,用线绳扎紧,在1

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