凝胶电泳蛋白质染色方法研究进展.pdf

维普资讯 2006年第 5期 凝胶 电泳蛋 白质染色方法研究进展 常胜合 ，舒海燕 ，秦广雍 ，李宗伟。，李宗义 ，王雁萍 ，杨天佑 ，陈林海 (1．郑州大学物理工程学院离子束生物工程省重点实验室，河南 郑州 450052； 2．郑州大学生物工程系，河南 郑州 450001) 摘要：蛋白质条带染色是蛋白质凝胶电泳中一个重要的步骤。目前的方法主要有考马斯亮兰染 色、银染、荧光染色、负染等。将考马斯亮兰与BBR相结合进行染色，可以减少染色／脱色的次数， 能够提高考马斯亮兰在蛋白质条带上的染色效果。GallyasIntensifying方法与银染相结合，能提高 用银染已经检测到的蛋白质条带的亮度，使蛋白质点之间及其与背景之间更容易区分。将银染与 考马斯亮兰结合起来进行染色可以提高同一块胶上微量蛋白质检测灵敏度。目前，对染色方法改 进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度，操作方便与否，费用是否昂贵等方面。如何在保持银 染方法高灵敏度的同时，又能够有效地降低染色背景，用无毒的化学物质去替换现在凝胶电泳中常 用的有毒物质，克服荧光染色使蛋白质化学性质改变的缺点，在保持负染不修饰蛋白质条带化学性 质优势的同时，对蛋白质条带染色结果加以改善等，可能代表了蛋白质条带染色的未来发展方向。 关键词：SDS—PAGE；蛋白质条带；染色；方法 中图分类号：Q51 文献标识码：A 文章编号：1004—3268(2006)05—0008—05 AdvancesinMethodsofProteinBandsStainingonSDS—。—PAGE CHANGShenghe，SHUHaiyan2，QIN Guang—yong，LIZong—wei， LIZong—yi，、ANG Yan—ping ，YANGTian—you ，CHEN Lin—hai (1．ProvincialKeyLaboratoryofionBeamBio-engineering，PhysicalCollege，ZhengzhouUniversity， Zhengzhou450052，China；2．Bio-engineeringDepartment，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001，China) Abstract：Protein—bandsstaining isanimportantstepduringtheproteinelectrophoresis．Coomassie BrilliantBlue(CBB)staining，silverstaining，fluorescentdyesstainingandreversestainingwerethe mainstainingmethodswidelyused．CombinationCBB andBismarkBrownR canreducestaining／ destainingtimesandenhancetheeffectofCBB．ModifiedsilverstainingusingGallyasINTENSIFY— ING canincreasesensitivityofproteinstainingtovisualizefaintorinvisibleproteinsseparatedonsil— ver—stainedSDS—PAGE．Itiseasiertodistinguishspotsfrom eachotherandthebackgroundonthe silver-stainedgels．DoublestainingoftheCBB—stainedgelwithsilverstainingcanalsoincreasethe ．sensitivityofdetectionoftracepro