半夏蛋白对人肝癌细胞Bl42生长抑制作用的研究e70一.pdf

2006年第28卷第 l2期 湖北中医杂志 ·11 · 半夏蛋白对人肝癌细胞Bel一7402生长抑制作用的研究 黄必胜 (湖北 中医学院，湖北 武汉 430065) 摘 耍：目的：观察并比较半夏蛋 白对体外培齐人肝癌细胞Bd一7402生长的抑带l作用 方法：应用MTT技术 检测半夏蛋 白对人肝癌细胞 Bel一7402的抑制作用．并观察其量效关系。结果：3O％沉淀、6O 沉淀及 Tris—HCI洗 脱峰的量效关系不明显，0．05M和 0．1M NaCl的洗脱峰呈现较好 的量效关系，且对 Be]一7402细胞 的抑制作用与空 白时照组有显著性差异 (PO．05)。结论 层析后的半夏蛋白对体外培养肝癌细胞增殖有较好的抑制作用．呈现显 著的量效关系 关键词 ：；半夏蛋 白；人肝癌 细胞 系 Bel一7402；生长抑制 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：A 文章编号：1000—0704(2006)12—001l—O2 半夏具有燥湿化痰、降逆止呕 消痞散结等功效。临床 司,RPMI1640(GIBC()产 品)；噻唑蓝 (MTT)、碘化丙啶 (PI)均 上可将其单独或与其他药物配伍，用于治疗食管癌、肝癌等。 购 自sigtm 公司}胎牛血清、新生牛血清 (三利生物制品厂产)。 近年来对抗癌中药的研究发现 ．半夏的作用途径主要是通过 乙酸乙酯、石油醚、95 乙醇等其它均为国产分析纯。 杀伤癌细胞、抑制细胞生长、诱导细胞凋亡、调节机体免疫功 MTT溶液的配制：将 25mgMTT溶于5mlPBS中，用 能来实现的[ 。研究也发现．半夏乙醇提取液、掌叶半夏 0．22m微孔滤膜过滤．于4℃避光保存。 蛋白分别对肝癌细胞 (HepG。)、卵巢癌细胞生长具有抑制作 1．3 细胞 系厦培养 用 一]。然而有关半夏及其类似品中所含蛋白的抗癌作用 人肝癌细胞系Bel一7402由武汉大学中国典型培养物保 的差异。目前尚未见报道。笔者采用不同提取方法．观察并 藏中心(CCTCC)提供，用 50ml的培养瓶，将人肝癌细胞系 比较不同产地的半夏蛋白对人肝癌细胞Bd一7402细胞的生 (Bd一7402)接种千古 100u／ml青霉素、0．1g／L链霉索和 长抑制作用。现报道如下 lO％新生牛血清的RPMI1640培养液中．细胞浓度为2× 1 材料、试剂与仪器 10／m1．置于5 co2，37℃的培养箱中培养。 1．1 药物来源 1．4 仪 器 半夏鲜品采 自湖北钟样 ．经湖北中医学院鉴定教研室鉴 SHELLRBCO2恒温细胞培养箱；Olympus倒置显徽 定为正品 镜；SHZ一82A恒温震荡器；无菌操作 台(苏州净化设备厂 1．2 试剂及配制 产)!SUNRISE酶标仪；超声清洗器 (SK3200H)；90—2型定 )、胰蛋白酶氯霉素、青霉素、E叽 购自imr．esco公 时恒温磁力搅拌器；LDZX一40立式电热压力蒸汽灭菌器； 与造模组比较，*P0，05，**P0．01l与SIAg对照组比较．△P0．05，AAP0．01。 3 讨论 正相关关系，两个浓度组的作用均强于史泰必安阳性药对照 机体免疫力的高低．直接影响创面愈合。虎黄搽剂是一 组．因此，该搽剂能调节整个机体的免疫功能．包括非特异性 种中草药复方制剂．其组方 中的黄芪 ．性甘温 ．有补脾益气． 免疫及特异性体液免疫功能．从而增强机体的防御和修复功 提高机体免疫力的作用。动物实验证明．该搽剂能显著地提 能，有利于创面的修复。 高小鼠血清溶血素水平．表现为