双配体修饰的阿霉素脂质体靶向于脑胶质瘤的体外 - 中国现代应用药学.pdf

·论 著· 双配体修饰的阿霉素脂质体靶向于脑胶质瘤的体外研究 吕清1,2 2 2 2 1* 2* ，韩 ，李黎明 ，郑艳榕 ，李范珠 ，高建青 (1.浙江中医药大学药学院，杭州 310053 ；2.浙江大学药学院， 旻 杭州 310058) 摘要：目的 筛选和优化转铁蛋白、叶酸共同修饰的阿霉素脂质体的处方及制备工艺，以期得到具有良好的脑胶质瘤靶向 治疗作用的给药系统。方法 采用薄膜分散和硫酸铵梯度法制备阿霉素脂质体。将叶酸连接至二硬脂酸磷脂酰乙醇胺-聚 乙二醇2000(DSPE-PEG2000-NH2)得到DSPE-PEG2000-Folic ，考察不同磷脂种类、药脂比、水化介质和载药时间，对脂质 体粒径、包封率和稳定性的影响，确定脂质体的处方工艺。以大鼠的脑毛细血管内皮细胞(bEnd3)和星形胶质细胞组成体 外血脑屏障(blood-brain barrier ，BBB) ，并结合大鼠胶质瘤C6 细胞，构建体外模拟胶质瘤靶向治疗的复合BBB 模型。考 察阿霉素脂质体在bEnd3 细胞中的摄取机制和透过BBB 的转运速率及对C6 细胞的毒性。结果 确定了DSPC 作为主要 1 磷脂组分，并以 120 mmol·L 的硫酸铵作为水化介质，药脂比为1 ∶15，载药时间选择60 min ，成功制备了高包封率和稳 定性的双配体脂质体。其在bEnd3 细胞中摄取远大于普通脂质体(P0.05) ，摄取过程受网格蛋白和小窝内陷介导的细胞内 吞作用，并受转铁蛋白和叶酸的影响；同时其在BBB 模型中的药物透过速率、及其进一步透过BBB 后对下层C6 细胞的 毒性，均显著高于其他脂质体组。结论 转铁蛋白和叶酸共同修饰的阿霉素脂质体具有较好的体外脑胶质瘤靶向治疗作用。 关键词：阿霉素；转铁蛋白；叶酸；脂质体；胶质瘤 中图分类号：R965.1 ；R943 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2012)11-0963-08 Study of Doxorubicin Liposome Modified with Transferrin and Folic Acid Targeting to Glioma in Vitro 1,2 2 2 2 1* 2* LÜ Qing , HAN Min , LI Liming , ZHEN Yanrong , LI Fanzhu , GAO Jianqing (1.Department of Pharmaceutics, Zhejiang Chinese Medical Un iversity, Hangzhou 310053, China; 2.Institute of Pharmaceutics, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To carry out the optimization of formulation and preparation process of the transferrin and folic acid co-modified doxorubicin liposomes [Tf (FA)-DOX-lipo], investigating the glioma targeting therapeutic effects. METHODS Tf (FA)-DOX-lipo was prepared by thin-film evaporation method and ammonium sulfate gradient method . First, folic acid was connected to 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[amino(polyethylene glycol)-2000 to get the DSPE-PEG2000- Folic. Furt