多光子激发扫描显微镜操作步骤 - 微奈米科技研究中心 - 成功大学.pdf

多光子激發掃描顯微鏡操作步驟 勿靠近雷射電源供應器背面！ 一、檢查 兩台冰水機: 20℃。(位於靠牆壁側) 二、確認雷射面板為 standby ，將key (2號鈕 由) standby轉到 on （請放輕），等待雷射 穩定（顯示 OK ），按下shutter open (8號鈕開啟快門，) 填寫紀錄本，紀錄雷射在 840 nm的強度 (一般約於3260 mW 左右) ，如下圖。 雷射強度 雷射波長 目前進行的%數 Status OK 三、開啟硬體設備開關： (1)開啟 Shutter 控制器電源(位於上方平台靠牆壁側 ) (2)開啟 OM stage 控制器電源(位於上方平台靠牆壁側 ) (3)開啟 Galvo 控制器電源(位於上方平台靠牆壁側 ) (4)開啟 Power meter延長線開關及其電源(延長線開關於上方平台靠牆壁側最右邊 那顆，電源則 為側邊紅色鈕，向上輕扳即可開啟) (5)開啟 photon counting 板電源(位於前側平台上方) 成功大學微奈米中心 林光儀、劉淑白編撰 2016.12.05 多光子激發掃描顯微鏡操作步驟 四、下圖為 OPO的 Laser通道，目前只開放 左邊通道 1(波長 680~1080 nm) 。 五、開啟 OPO 平板電腦的OPO軟體（ chameleon_opo ）。 ※請勿按到bypass ，因功率很強，危險※ 六、調整及確認雷射功率： (1)設定 power meter偵測之波長(操作方式為圓形鈕按兩下切換到laser頁面，透過 最左邊的三角形鈕切換雷射波長，再按下圓形鈕確認條件) (2) 將power meter 接收器移到黃色方塊位置 ，由 OPO軟體選擇 Pump out開啟雷 射 ，讀取 power meter螢幕 上的值，並調整ND filter使雷射功率落在需求值 (3)調整完畢後點選 Pump out關閉雷射 ，再將接收器往左移開 (4)再次點選 Pump out開啟雷射 ，並使用遮光板遮住OPO螢幕 ※操作 power meter 接收器請使用左手以免碰觸到光學元件 ※ Power Meter 成功大學微奈米中心 林光儀、劉淑白編撰 2016.12.05 多光子激發掃描顯微鏡操作步驟 七、開啟多 光子系統軟體，順序如下 ： 參數參考 ： (1) 執行 FPGA V110116 #of pixels: 256 X-Y: 1x1 (2) 執行 Host V110330 Scan rate: 25 kHz Times/layer: 1 八、程式操作畫面解說如附件 一，調整所需參數 。 (1) 每次操作前請先將scan range設為 0 ，並scan 一次，讓 Galvo回原點 (2) 依照使用的物鏡倍率進 APL mode設定 1V的 range(參考桌面物鏡倍率txt檔) (3) Z stage確認 為prior stage 九、確認系統狀態， 每次開始實驗前皆須使用螢光標準片確認系統狀態 ，順序如下： (1)開啟 OM 主電源顯微鏡機身左側( ) ，放上綠色螢光標準片並進行對焦，若使用 水鏡必須在樣品上滴水，且與物鏡接