载阿霉素柔性脂质体的性质及体外抗肿瘤效应.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３３（３）：９１４ 载阿霉素柔性脂质体的性质及体外抗肿瘤效应  郭春芳　张阳德　王吉伟 　潘一峰　廖明媚　王　宁 （中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心　长沙　４１０００８） 摘要　目的：通过比较膜软化剂的添加对阿霉素（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ，ＤＯＸ）脂质体载药性能及体外肿瘤 细胞杀伤活性的影响，评估柔性脂质体用于静脉给药的潜在应用价值。方法：以ＤＯＸ为模型药 物，膜水化法制备阿霉素传统脂质体（ＤＯＸＣＬ）及阿霉素柔性纳米脂质体（ＤＯＸＦＮＬ）。葡聚糖凝 ? ? 胶层析柱法比较两种脂质体的包封率；膜透析法检测两种载体药物释放度；粒度分析仪测定不同 ｐＨ和介质下两类脂质体的水动力学粒径、电位及多分散系数（Ｐｏｌｙｄｉｓｐｅｒｓｉｔｙｉｎｄｅｘ，ＰＤＩ）；ＭＴＴ法 检测两类脂质体对人乳腺癌ＭＣＦ７肿瘤细胞的杀伤效率；流式细胞术（ＦＣＭ）检测两类脂质体作 ? 用后ＭＣＦ７的细胞周期。结果：ＤＯＸＦＮＬ的包封率较传统脂质体高；在中性ｐＨ条件以及在纯 ? ? 水、生理盐水、ＰＢＳ、ＲＰＭＩ１６４０培养液及 １０％ＦＢＳＲＰＭＩ１６４０培养液中，ＤＯＸＦＮＬ的悬浮稳定性 ? ? ? 更为优良；ＤＯＸ在中性 ｐＨ下的释放度稍低于ＤＯＸＣＬ（Ｐ＜０．０５）；ＭＴＴ法测得两类脂质体对 ? ＭＣＦ７细胞的细胞抑制率差别不大，但ＤＯＸＦＮＬ的细胞抑制作用更为持久（Ｐ＜０．０５）；ＦＣＭ检测 ? ? 结果表明，ＤＯＸＦＮＬ主要将ＭＣＦ７细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１期，且效果明显强于ＤＯＸＣＬ（Ｐ＜０．０５）。 ? ? ? 结论：与传统脂质体相比，ＤＯＸＦＮＬ具有更高的药物包封率和稳定性。ＤＯＸＦＮＬ不但可通过对 ? ? 细胞周期的高效阻滞抑制肿瘤细胞的生长，其在细胞内的作用时间也明显长于ＤＯＸＣＬ。 ? 关键词　盐酸阿霉素　柔性脂质体　乳腺癌 中图分类号　Ｑ５４ 　　纳米脂质体是一类能将药物包裹于磷脂双分子层 感的乳腺癌ＭＣＦ７细胞系为研究对象，从不同角度对 ? 内部的微型泡囊体，其外部的类脂质可以和细胞膜融 添加有膜软化剂的纳米脂质体的性能进行了初步分 合，进而将所携带的药物运输至细胞内部。在传统纳 析。重点对纳米脂质体是否会因成分的增加而导致性 米脂质体的基础上，如果添加某些具有膜软化功能的 质变化、具有高度变形性的ＦＮＬ是否能更好的被肿瘤 成分如胆酸钠、脱氧胆酸钠等［１］，便可以得到另外一种 细胞吞噬、药物分子是否能更加容易的被转运至肿瘤 新型脂质体—柔性纳米脂质体（ｆｌｅｘｉｂｌｅｎａｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅｓ， 细胞行使其肿瘤杀伤效应等进行了初步研究。 ＦＮＬ）。公认的理论认为，膜软化剂的加入扰乱了脂质 １　材料与方法 体双分子层磷脂酰基链的顺序，使得该类脂质体比传 统纳米脂质体具有更强的变形性。 １．１　材　料 　　虽然使用ＦＮＬ作为透皮给药制剂