重离子诱变技术选育碱性蛋白酶高产菌株 - 微生物所期刊联合编辑部.pdf

微生物学通报 JUN 20, 2010, 37(6): 845−851 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 重离子诱变技术选育碱性蛋白酶高产菌株 1* 1 1 2 2 1 薛林贵 景春娥 赵旭 张红 武振华 常思静 (1. 兰州交通大学化学与生物工程学院 甘肃 兰州 730070) (2. 中国科学院近代物理研究所 甘肃 兰州 730000) 摘 要: 从采集的土壤样品中分离筛选出一株碱性蛋白酶产生菌 G-41, 经 16S rRNA 分子鉴定为 芽孢杆菌属菌株。该菌株在发酵培养基中能产生较高产量的胞外碱性蛋白酶(1.7 × 104 U/mL) 。以 G-41 为出发菌株, 对其进行重离子辐照诱变处理, 获得突变株 G-41-68, 将该突变株再次经重离 子诱变, 从大量突变株中筛选出碱性蛋白酶高产菌株 15Gy-54, 其酶活力达到6.22 × 104 U/mL 。与 出发菌株相比较, 突变株G-41-68 和 15Gy-54 的酶活力分别提高了 1.58 倍和 2.65 倍。对突变株 15Gy-54 的发酵条件进行了优化研究, 结果表明, 该菌株的碱性蛋白酶活力得到进一步提高, 达到 7.18 × 104 U/mL, 其最适发酵条件为: 培养基(g/100 mL)为胰蛋白胨 1、酵母膏 0.5 、乳糖 5 、 Na HPO ·12H O 0.4 、KH PO 0.03 、Na CO 0.1 、MgSO 0.0481 (4 × 10−3 mol/L) 、pH 8.0, 培养温 2 4 2 2 4 2 3 4 度41°C, 振荡培养时间42−48 h 。实验结果表明, 重离子辐照诱变技术是一种非常有效的微生物诱 变育种新技术。 关键词: 重离子诱变, 芽孢杆菌属, 碱性蛋白酶, 发酵 The Selection for High-yield Alkaline Protease Producing Strain by Heavy-ion Irradiation XUE Lin-Gui1* JING Chun-E1 ZHAO Xu1 ZHANG Hong2 WU Zhen-Hua2 CHANG Si-Jing1 (1. College of Chemical and Biology Engineering, Lanzhou Jiaotong University, Lanzhou, Gansu 730070, China) (2. Institute of Modern Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou,