第一篇-生命化学基础.ppt

水的势能 水流的趋势。 当植物组织浸入外界溶液中时，若植物的浓度大于外液的浓度，则细胞吸水；反之?,?植物细胞失水；若细胞和外液的浓度相等，则外液浓度不发生变化。 水的势能与其浓度成反比。 2、果糖 3、胆固醇 主要存在真核细胞膜上，含量一般不超过膜脂的1/3，植物细胞膜中含量较少，广泛存在与动物细胞膜中，其功能是提高脂双层的稳定性，调节双脂层流动性，降低水溶性物质的通透性。 蛋白质含量测定 氨基酸残基：多肽链中的每一个氨基酸单位叫做氨基酸残基，因为在形成肽键时丢失了一分子水。 肽键：C—N单键有40%的双键性质，C=O双键有40%的单键性质。 肽平面：肽键中的C—N具有双键性质不能自由旋转，结果肽键的4个原子和与之相连的两个α-碳原子都处于同一个平面内，此平面称为肽平面。 毛发横切面和毛发?-角蛋白的结构 超二级结构 蛋白质中，由若干相邻的二级结构单元（如?-螺旋、?-折叠、 ?- 转角）组合在一起，彼此相互作用，形成有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体，以充当三级结构的构件，称为超二级结构。 结构域（structure domain） 溶菌酶分子的三级结构 （4）、蛋白质的四级结构 定义 蛋白质分子的结构层次 蛋白质的带电状态 当溶液pH＝pI时，蛋白质所带正、负电荷相等； 当溶液pH＜pI时，蛋白质带净正电荷； 当溶液pH＞pI时，蛋白质带净负电荷. 蛋白质的沉淀 b.不可逆沉淀 不可逆沉淀是指沉淀出来的蛋白质分子，其内部 结构发生了较大的改变，蛋白质已失去了原来的生物 活性，即使沉淀因素消失后，沉淀也不重新溶解。在 蛋白质溶液中加入某些水溶性的有机溶剂，如丙酮、 乙醇等，由于这些溶剂与水的亲和力大于蛋白质，破 坏了蛋白质胶体外层的水化膜，并可逐步进入蛋 白质的内部，有利于蛋白质的沉淀，此种作用在短时 间及低温时，沉淀是可逆的，但作用时间长或温度较 高时，则是不可逆沉淀 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 双向电泳 不同处理天数小麦叶片蛋白SDS检测及含量测定 双向电泳分析UV-B辐射后的差异蛋白 部分差异蛋白点的质谱鉴定结果 四、酶 酶与一般催化剂的共同点 酶（enzyme） 活细胞产生的以蛋白质为主要成分的生物催化剂。 酶作为生物催化剂的特点 1. 酶易失活：要求温和的条件，如常温、中性pH。 3、酶的分类 4、酶的底物专一性(specificity) 关于酶作用专一性的假说 “锁钥学说”（lock and key theory） 1894，Fisher (1)锁钥假说：认为整个 酶分子的天然构象是具 有刚性结构的，酶表面 具有特定的形状。如同 一把钥匙对一把锁一样 (2)诱导契合假说: 该学说认为酶表面并没 有一种与底物互补的固 定形状，而只是由于底 物的诱导才形成了互补 形状. （一）酶的必需基团与活性中心 酶催化作用的中间产（络合）物学说 在酶催化的反应中，第一步是酶与底物形成酶－底物中间复合物。当底物分子在酶作用下发生化学变化后，中间复合物再分解成产物和酶。 E + S ==== E-S ??? P + E 6、酶促反应动力学 是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学。 （一）底物浓度[S]对酶反应速率的影响 米氏常数的求法—双倒数作图法 (二) 酶浓度对酶反应速率的影响 V∝ [E] （三）pH对酶反应速度的影响 （四）温度对酶反应速度的影响 （五）激活剂对酶反应速度的影响 某些还原剂：GSH、Cys、Vc 金属螯合剂 (六) 抑制剂对酶反应速度的影响 酶的抑制剂一般具备两个方面的特点： a.在化学结构上与被抑制的底物分子相似。 b.能够与酶的活性中心以共价或非共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。 抑制作用的类型： (1)不可逆抑制： 抑制剂与酶活性中心的必须基团以共价形式结合，引起酶的永久性失活。如有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯。氰化钾有剧毒，是呼吸酶的抑制剂。 (2)可逆抑制作用： 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性 暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去， 并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与 酶结合的情况，又可以分为两类： 竞争性抑制： 某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物 竟争与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合 后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反 应被抑制了。 竟争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底 物的竞争能力来消除。 非竞争性抑制：酶可同时与底物及抑制剂结合， 引起酶分子构象变化，并导致酶活性下降。不是 与底物竞争活性中心，所以称为非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Ag+、Hg2+）。非竟争性