Ezrin在乳腺癌中表达及其临床意义.docVIP

Ezrin在乳腺癌中表达及其临床意义[摘要] 目的 探讨膜细胞骨架连接蛋白Ezrin在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组化方法检测54例乳腺浸润性导管癌组织中Ezrin蛋白的表达,选择非典型增生5例,纤维囊性乳腺病9例和男性乳腺发育症2例作为对照。结果在乳腺浸润性导管癌中,有淋巴结转移组Ezrin的表达高于无淋巴结转移组。结论Ezrin与乳腺浸润性导管癌的浸润和转移密切相关,可以作为预测乳腺浸润性导管癌淋巴结转移的重要肿瘤标志物。 [关键词] Ezrin;乳腺肿瘤;淋巴结转移;肿瘤标志物 [中图分类号] R737.9[中图分类号] A[文章编号] 1673-9701(2009)24-168-02 乳腺癌是最常见的恶性肿瘤之一,约占妇女全部癌症的1/4,多年以来,乳腺癌发病率以经济发达国家最高。但近年来,我国妇女乳腺癌的发病率逐年升高,并有发病年龄降低的趋势。膜细胞骨架蛋白Ezrin是ERM(Ezrin-radixin-moesin)家族成员之一,通过连接细胞骨架和细胞膜,对细胞黏附、形态、分化、运动等起重要调节作用。近来研究表明,Ezrin促进肿瘤转移[1,2]。Andrea 等[3]运用消减杂交技术发现,在鼠乳腺癌细胞株中Ezrin 是一个肿瘤转移基因。Ezrin 蛋白的C末端与细胞骨架的肌动蛋白相连,N 末端则可通过与细胞表面黏附分子cadherin、CD44 等连接,调节细胞-细胞及细胞-细胞外基质之间的黏附,从而影响肿瘤细胞侵袭性等生物学行为[4,5]。本研究通过免疫组化方法观察Ezrtin在乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况,来探讨Ezrin与乳腺浸润性导管癌侵袭转移的关系。 1材料与方法 1.1材料来源 收集本院2005～2007年乳腺切除或单纯性乳腺包块的组织标本70例,其中,非典型增生5例,纤维囊性乳腺病9例和男性乳腺发育症2例作为对照,浸润性导管癌54例,其中22例伴淋巴结转移;全部病理均经组织病理学证实。 1.2方法 采用免疫组织化学(IHC)S-P法,4μm厚的连续切片,抗原修复采用高温高压法,S-P试剂及Ezrin单克隆浓缩型抗体均购置福州迈新生物技术有限公司(1∶300)稀释,每次实验均用已知阳性切片做阳性对照,用PBS代替一抗做阴性对照,DAB显色,苏木素复染,中性树胶封片,显微镜随机选取5个视野,每个视野计数1000个细胞。 1.3结果判定 Ezrin阳性反应为细胞膜及细胞浆的棕黄染色,呈均一弥漫性分布,按染色强度和阳性表达细胞数,参考Mathew等分级标准:-,无表达;+,50%细胞阳性表达或染色较浅;++,≥50%阳性表达且深染。(++)称为强阳性。 1.4统计学方法 采用统计软件SPSS10.0进行统计学分析,采用卡方检验及Speaman等级相关分析,P0.05表明差异有显著性。 2结果 2.1Ezrin 在良性乳腺增生组织中的表达 在良性乳腺增生组织中,Ezrin主要分布在腺导管上皮和腺泡上皮细胞胞膜,呈阳性棕黄色颗粒着色(图1)。 2.2Ezrin 在乳腺浸润性导管癌组织中的表达 Ezrin在部分乳腺癌组织中胞膜呈强阳性表达,也有部分在胞浆内呈弥漫性强染色(图2)。Ezrin 在乳腺浸润性导管癌中有33例强阳性表达(33/54,61.11%)。 2.3Ezrin表达与乳腺癌临床病理参数的关系 Ezrin在乳腺浸润性导管癌中有33例异常表达(33/54, 61.11%),其中在32例无转移的癌组织中有15例异常表达(15/32,53.12%),而在22例有淋巴结转移的癌组织中16例异常表达(16/22,72.73%)。x2检验表明,Ezrin 在无转移的癌组织中的异常表达率较有转移的癌组织明显减低,二者之间差异有显著性(x2=4.261,P=0.039)。Ezrin的异常表达与乳腺癌转移淋巴结数量的多少密切相关,转移淋巴结数量越多,Ezrin 的阳性表达率越高(x2=4.234,P=0.040)。见表1。 3讨论 侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,是导致手术、放疗及化疗等治疗失败和患者死亡的最主要原因,也是一个极其复杂、多步骤的过程,包括癌细胞从原发部位脱落,结合并降解基底膜;癌细胞侵入血管、淋巴管;癌细胞在循环中运行和滞留;最后穿出血管、淋巴管并增殖形成转移灶。研究表明,Ezrin在肿瘤的侵袭和转移中扮演重要角色[8,9]。Ezrin是ERM蛋白家族(Ezrin,Radixin和Moesin)中研究较深入的细胞内骨架蛋白,通过其C-,N-末端分别与细胞骨架和细胞膜蛋白的结合,形成专门的膜区域结构,调节细胞活动如生存、黏附、迁移、侵袭