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HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素含量
HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素含量[摘要] 目的:用HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量。方法:采用ODS-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸(55?45);流速1.0 ml/min;检测波长360nm。结果:异鼠李素浓度在2.82~28.20 μg/ml范围内线性良好,r=0.999 8(n=8),平均回收率为100.18%,RSD为1.73%(n=9)。结论:本法可用于控制垂盆草中有效成分的含量,简便、准确、灵敏度高。
[关键词] 垂盆草;提取物;含量测定;HPLC
[中图分类号]R917[文献标识码]B[文章编号] 1673-7210(2007)12(c)-160-02
Content determination of isorhamnetin in the extract of Sedum sarmentosum Bunge by HPLC
MA Jia-lei, LI Qun-li*, XU Ling-ling
(Medical College of Jinhua Profession and Technology College, Jinhua321007, China)
[Abstract] Objective: To develop a method for the content determination of isorhamnetin in Sedum sarmentosum Bunge. Methods: The samples were analyzed on an ODS-C18 column with mobile phase of methanol-0.4% phosphoric acid (55?45) at flow rate 1.0 ml/min and detective wavelength of 360 nm. Results: The standard curves were linear relationship at the range of 2.82~28.20 μg/ml(r=0.999 8).The average recovery was 100.18% (RSD=1.73%). Conclusion: The method can be used to determine the content of isorhamnetin in Sedum sarmentosum Bunge.The method is simple,accurate and suitable for the quality evaluation of Sedum sarmentosum Bunge extract.
[Key words] Sedum sarmentosum Bunge;Extract;Content determination;HPLC
垂盆草系景天科植物垂盆草的新鲜或干燥的全草,味甘、淡、性凉,具有清热解毒、利尿消肿、排脓生肌之效。化学研究表明,垂盆草主要含有糖类、黄酮类[1]、氰苷类成分等[2,3]。药理学研究表明,垂盆草具有抑制炎性渗出,减少肝细胞损伤的作用,能显著降低肝炎患者血清谷丙转氨酶[4~6],临床广泛用于急性肝炎、迁移性肝炎及慢性肝炎活动期的治疗。目前临床应用的垂盆草制剂(如冲剂、颗粒剂、片剂等)中有效成分含量差别很大[7]。本文经过对其有效成分进行HPLC法含量控制,提高其提取率,从而促进垂盆草制剂的临床应用。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Waters 2487高效液相色谱仪,附有2487紫外分光检测器,Breeze色谱工作站,20 μl自动进样阀。
1.2 试剂
磷酸(无锡阳山生化有限责任公司),甲醇(上海诚心化工有限公司),均为GR。
1.3 对照品
异鼠李素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110860-200407)。
1.4 样品
垂盆草提取物(自制;批20060702
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.4%磷酸(55?45);流速1.0 ml/min;检测波长360 nm;灵敏度0.1Aufs;进样体积20 μl;理论塔板数以异鼠李素峰计不低于5 382。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取异鼠李素对照品约14.1 mg,置于250 ml的量瓶中,加甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,备用,作为储备液。精密吸取储备液6 ml,置于25
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