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一氧化氮合成酶基因多态性及冠心病关系[摘要] 目的：测定中国汉族人群内皮型一氧化氮合成酶基因(eNOS)G894T多态性，研究其在中国汉族人群中的分布以及与冠心病的关系。方法：对127例冠心病患者和110例正常人检测eNOS 基因多态性。结果：中国汉族人群eNOS基因有GG 、GT、TT三种基因型，GT＋TT型与GG型和G、T等位基因频率在正常人和冠心患者中比较无差异（P0.05）。结论：中国汉族人群eNOS基因多态性与冠心病无关。 [关键词] 冠心病；基因；一氧化氮合成酶；多态性 [中图分类号] R541 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）04（b）-033-02 Association of eNOS gene G894T polymorphism with coronary heart disease JIANG Da-jun1, JI Lin-lin2, DING Cui-cui1,ZHANG Hong-hong1 (1.Jimo People′s Hospital，Jimo 266200,China;2.Jimo TCM Hospital，Jimo 266200,China） [Abstract] Objective:To investigate the distribution of the the G894T mutation at exon 7 in the endothelial nitric oxide synthase gene in Chinese Han nationality and analyze the association of them with coronary atherosclerotic heart disease (CHD).Methods: The G894T polymorphism in the eNOS gene were detected in 127 patients with CHD and 110 unrelated health individuals. Results: Three gene types were identified as GG, GT, TT in the eNOS gene. The eNOS genotype distribution and G, T alleles frequencies in CHD patients were not significantly different with that in the normal subjects(P0.05），经详细询问病史和体格检查、心电图、血常规 、血生化检查，排除冠心病、糖尿病、高血压患者。本研究人群个体之间无血缘关系。 1.2 方法 1.2.1 标本收集与DNA 制备空腹抽静脉血1 ml，按常规蛋白酶K与酚、氯仿抽提方法，抽提外周血细胞DNA。 1.2.2 基因扩增上游引物： 5′-CTGCAGACCACTCCCATCCTTTCT-3′，下游引物：5′-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAA-3′。 1.2.3 基因多态性检测用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳，0.2%硝酸银染色检测PCR产物。凝胶成像仪下观察结果并照相，确定基因型。 1.3 统计学分析 应用SPSS10.0统计软件包对各基因型频率及等位基因频率的比较进行χ2 检验，检验水准α=0.05。 2 结果 2.1 eNOS基因多态性分析电泳结果 [Mark：DNA分子量标准，1、2、3、4、6、7：GG纯合子（206 bp），5：TT纯合子（119 bp、87 bp），8：GT杂合子（206 bp、119 bp、87 bp）] 2.2eNOS基因的Hardy-Weinberg平衡检验结果 见表1。 经计算，eNOS基因型在各组中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡 2.3 两组eNOS基因型及等位基因分布 见表2。 GT+TT基因型与GG基因型比较病例组和对照组差异无显著性，χ2=0.545，P0.05。病例组等位基因分布与对照组分别比较均无显著性差异，χ2=0.442，P0.05。 3 讨论 人eNOS基因为单拷贝，定位于染色体7q35-36，包括 25个内含子和 26个外显子。eNOS基因存在多种多态性，本研究涉及的是G894→T多态性。G894→T多态性可导致所编码的氨基酸的Glu298Asp多态性，Glu298Asp的错义导致eNOS在此处的构象发生改变，由α-螺旋变为紧密折叠，由此推测此突变可能影响eNOS蛋白的功能，使一氧化氮生