双七接骨胶囊质量标准中鉴别方法探析.doc

双七接骨胶囊质量标准中鉴别方法探析摘要：目的：探讨双七接骨胶囊质量标准中鉴别的方法。方法：采用显微、薄层色谱及理化鉴别的方法，对方中的地鳖虫、三七、自然铜等药物进行定性分析。结论：采用的方法，拟订的标准能有效地控制双七接骨胶囊的质量。 关键词：双七接骨胶囊；鉴别方法；探讨 中图分类号：R927.11　文献标识码：A　文章编号：1007－2349(2008)03－0046－02 双七接骨胶囊(现获批文为滇药制字Z05F02806)是玉溪市中医医院骨伤科治疗骨折、跌打损伤的专科用药，医院制剂室将其研制成胶囊剂供临床使用，为有效地控制其质量，故对其质量标准中薄层色谱鉴别方法进行探讨。 1　试药样品 1.1　试药　使用的试剂均采用分析纯试剂；薄层层析板，采用硅胶G(青岛海洋化工有限公司制造)手工铺板制备。对照品三七皂苷、人参皂苷Rbl、Rgl由中国药品生物制品所生产，代码110704－200319；0703－200120。 1.2　样品　双七接骨胶囊由玉溪市中医医院制剂室生产。 1.3　处方　地鳖虫、煅自然铜、三七、血竭、续断、乳香等。 1.4　制法　血竭、部分地鳖虫，粉碎备用，其余药物水煮提取。第1次2h，第2、3次各1h。提取液浓缩成稠膏，加入地鳖虫细粉混匀、干燥、粉碎、加入血竭细粉，混匀后填充胶囊。调粒重为0.33g，每粒相当于原生药约1g。成品为胶囊剂，内容物为棕红色至褐色的粉末；气腥，味微苦微咸。 2　质量标准中鉴别标准的制定 2.1　地鳖虫的显微鉴别　取胶囊的内容物，稀甘油制片，置显微镜下观察：可见地鳖虫的体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径5～32μm，可见长短不一的刚毛；已脱落的刚毛散在，长短不一。阴性对照品未见以上特征。(不含地鳖虫的阴性对照品：按处方比例，取除地鳖虫外的其余药材，按制剂工艺制备阴性模拟制剂。)见图1。 2.2　三七的薄层鉴别 2.2.1　样品溶液的制备　取胶囊内容物2g，加乙醇15mL浸渍30min以上，不时振摇(或超声提取5rain)，滤过(药渣备用)，滤液挥干，残渣加水5mL充分搅拌使溶解，滤过(水不溶物备用)。滤液加水饱和的正丁醇溶液5mL提取，分取正丁醇层，加正丁醇饱和的水5mL洗涤，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。 2.2.2　三七对照品溶液的制备另取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷Rt对照品，加甲醇制成每1mL各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。 2.2.3　阴性溶液的制备 按处方比例另取除三七外的其余药材，按制剂工艺制备阴性模拟制剂，后按上述供试品溶液制备，同法制得缺三七的阴性对照溶液。 2.2.4　薄层色谱鉴别 照薄层色谱法(《中国药典》附录VIB)试验，吸取供试品溶液15～20μl、对照品溶液2～4μl，阴性对照液15～20uｌ分别点于同一硅胶G薄层板上，以1，2二氯乙烷一正丁醇一甲醇一水(30:40:15:25)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰。见图2。 2.3　自然铜的化学鉴别取三七样品溶液制备中的药渣，挥干，取约0.5g，加稀盐酸试液5mL，活性炭0.5g加热煮沸数分钟，滤过，取滤液4～5滴，置白瓷滴板内，加亚铁氰化钾试液1～2滴，即生成深兰色沉淀(或加硫氰酸铵试液，即显血红色)。不含自然铜的阴性对照溶液呈负反应。阴性对照无干扰。(阴性对照溶液的制备：按处方比例另取除自然铜外其余药材，按制剂工艺制备阴性模拟制剂，后按上述供试品溶液制备，同法制得缺自然铜的阴性对照溶液)。 2.4　血竭的化学鉴别 取三七样品溶液制备项下的水不溶物，加乙醇2mL溶解，取溶液1mL，加盐酸10滴及水10～15滴，产生棕黄色沉淀。沉淀放置后逐渐凝成棕黑色树脂状物。而阴性对照溶液为负反应，无干扰。(阴性对照溶液的制备：按处方比例另取除血竭外的其余药材，按制剂工艺制备阴性模拟制剂，后按供试品溶液制备，同法制得缺血竭的阴性对照溶液)。 3　讨论 方中三七、血竭散瘀消肿，止痛止血，乳香行气止痛，气行则血行，瘀散则痛止。当归、续断、补肝肾，续筋骨，补血行血，扶正。自然铜、地鳖虫续筋接骨止痛通经络，现代药理研究表明两药相配可加快骨痂的形成，促进骨折的愈合，加快瘀血的吸收。全方共奏活血消肿止痛，续筋接骨之效。 本制剂工艺中其地鳖虫加入了部分原生药，所以实验用显微法，对地鳖虫进行鉴别，将地鳖虫体壁碎片的显微特征列为鉴别依据，具有专属性。 薄层色谱法，对三七的主要成分进行专属性鉴别，三七主要含皂苷、黄酮苷、本实验选用其活性成份，达