呼吸道感染超广谱β-内酰胺酶细菌检测及药敏研究.doc

呼吸道感染超广谱β-内酰胺酶细菌检测及药敏研究摘要：目的：了解呼吸道感染革兰氏阴性菌产ESBLs发生率及耐药情况，指导临床合理用药。方法：采用双纸片协同试验法及复合纸片确证法对临床呼吸道标本分离的248株革兰氏阴性菌进行ESBLs检测。结果：产ESBLs菌占全部呼吸道标本革兰氏阴性菌的19.8％。产ESBLs菌对15种常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论：常规检测ESBLs对指导临床合理选用抗菌药物有重要意义。 关键词：革兰氏阴性杆菌；超广谱β－内酰胺酶；耐药性 中图分类号：R969.3　文献标识码：B　文章编号：1008－2409(2007)04－0809－02 β－内酰胺类抗生素是临床上应用最广泛的抗菌药物，近年来产超广谱β－内酰胺酶(ESBLs)的菌株愈来愈多。产ESBLs菌株不仅对三代头孢菌素有较高耐药率，而且对喹诺酮类、氨基糖甙类和磺胺类等临床常用抗生素均有不同程度耐药，给临床治疗带来困难。呼吸道感染是临床常见病、多发病，为了解呼吸道标本革兰氏阴性菌产ESBLs的发生率、分布及耐药特点，现对本院2004～2006年呼吸道标本革兰氏阴性菌产ES-BLs的情况及耐药性进行分析，报告如下。 1　材料与方法 1.1　材料 1.1.1 菌株来源本院2004～2006年住院及门诊患者呼吸道标本培养分离的248株革兰氏阴性菌。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922(ESBLs阴性)，肺炎克雷伯菌ATCC700603(ESBLs阳性)。 1.1.2　药敏纸片 M-H琼脂，头孢他啶(CAZ)30μg／片，头孢曲松(CRO)30μg／片，头孢噻肟(CTX)30μg／片，氨曲南(ATM)30μg／片，阿莫西林／克拉维酸(AMC)(20／μg／10μg)，头孢他啶／克拉维酸(30μg／10μg)，头孢噻肟／克拉维酸(30μg／10μg)等15种抗生素纸片购自杭州天和微生物有限公司。 1.2　方法 1.2.1 药敏试验采用K－B法，按2003年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准判断结果。 1.2.2　产ESBLs菌检测选用CAZ(30μg／片)、ATM(30／μg／片)、CRO(30μg／片)、CTX(30μg／片)。将AMC(20μg／10／μg)贴在涂有待测菌的M－H平板中心，其余贴四周，与AMC纸片间距20mm，35℃孵育18～24h，在近AMC侧出现“坑”或钥匙扣样抑菌环(抑菌环加强或双纸片协同敏感)时，则提示产ES－BLs菌株。 1.2.3　ESBLs确证试验使用CAZ(30μg／片)、CTX(30μg／片)和CAZ／克拉维酸(30μg／10μg)、CTX／克拉维酸(30μg／10μg)复合纸片进行试验，当任何一种复合纸片抑菌环直径≥其单独药敏纸片抑菌环直径5mm以上时可确定该菌产ESBLs。 2　结果 2.1 在革兰氏阴性菌引起的呼吸道感染中，以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主。248株革兰氏阴性菌中，检测出ESBLs菌49株，检出率为19.8％。详见表1。 2.2　248株革兰氏阴性菌中产ESBLs菌在不同疾病的呼吸道感染中的检出率：ICU病房13株，检出率31.0％(13／42)；肺结核并感染10株，检出率27.0％(10／37)；恶性肿瘤9株，检出率25.7％(9／35)；神经外科8株，检出率16.3％(8／49)；慢性病如糖尿病、甲亢伴呼吸道感染3株，检出率13.0％(3／23)；流感伴呼吸道感染6株，检出率9.7％(6／62)。 2.3　产ESBLs菌与非产ESBLs菌耐药率比较详见表2。 3　讨论 革兰氏阴性菌中的超广谱β－内酰胺酶由质粒介导，能水解青霉素类、第一、第二、第三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素如氨曲南，部分ESBLs可水解第四代头孢菌素类和氨曲南，但对碳青霉烯类和头霉烯类药物敏感，通常对酶抑制剂如克拉维酸、舒巴坦、他唑巴坦等敏感。由于耐药质粒的播散，从肠杆菌科其他细菌如摩根摩根菌、粘质沙雷菌、痢疾志贺菌及肠杆菌属、沙门菌属、变形杆菌属和枸椽酸杆菌属的某些菌种，以及肠杆菌科以外的细菌如绿脓假单胞菌中也可分离到ESBLs。 对呼吸道标本中检测出的革兰氏阴性菌均进行ESBLs检测，检出率最高依次为肺炎克雷伯菌(35.4％)、大肠埃希菌(31.5％)、弗劳地枸椽酸杆菌(27.8％)。呼吸道产ESBLs菌主要来自ICU病房、肺结核并呼吸道感染、恶性肿瘤患者，由于长时间使用抗生素，造成菌群失调，气管插管或放疗、化疗、机体抵抗力低下等原因，使患者对病原菌的易感性增强，呈现多重耐药，因此细菌的耐药性及ESBLs的检测是非常重要的。除亚胺培南外，产ESBLs菌对其余14种抗