豆粉菌落总数测定.ppt

豆粉菌落总数的测定 一、学习要求 　　1．学习固体饮料的采取方法和样品细菌总数测定的方法。 　　2．掌握食品样品的细菌菌落计数的原则，判定所检样品是否合格。 二、实验原理及目的 经过恒温培养箱培养48小时，根据菌落计数原则，计算培养基上长出的菌落总数，对食品的质量安全进行把关，同时可通过检验结果判定食品是否能食用。可以有效的防止或减少食物中毒和人畜共患病的发生，保障人民的身体健康。 三、实验设备和材料 1、设备： ? 恒温培养箱（36 ℃±1 ℃）、 冰箱（2 ℃～5 ℃）、 恒温水浴箱（46 ℃±1 ℃） 天平（感量为 0.1 g ） 均质器 、 振荡器 、洗耳球、电炉、小烧杯或称量纸 无菌吸管 ：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL 无菌培养皿：直径 90 mm pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸 放大镜或/和菌落计数器 2、材料 平板计数培养基，无菌生理盐水、磷酸盐缓冲液、食品检样 （豆粉）  四、实验步骤 (一)?????取样、稀释和培养  1、用烧杯或称量纸以无菌操作取豆粉检样25g，放于225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。 2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管内（注意吸管或吸管尖端不要触及稀释液面），振摇试管,混合均匀，制成1:100的稀释液。 3?、另取1 mL灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1 mL吸管。 4、根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度（要求做10-1、10-2和10-3三个稀释度），分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。 5?、稀释液移入平皿后，将冷却至46℃琼脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，混合均匀。 6、?待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。 7、培养结束后，根据菌落计数原则对菌落进行计数，得出样品的菌落数，判定样品是否合格（〈10000cfu/g）。