检测伐地那非的单克隆抗体制备方法.PDF

※工艺技术 食品科学 2010, Vol. 31, No. 12 45 郭杰标，许 杨* (南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，中德联合研究院，江西 南昌 330047) ：为了能够获得检测伐地那非的单克隆抗体，采用戊二醛作为连接剂，将伐地那非连接到载体蛋白上，使 伐地那非药效必需基团暴露在人工抗原表面作为主要抗原决定簇。经条件优化，偶联比为6.8:1 的抗原免疫小鼠后 产生的抗体滴度最高。通过杂交瘤技术获得了4 株能够同时识别伐地那非及其类似物Piperidenafil 的单克隆抗体。 ：磷酸二酯酶- 5 抑制剂；伐地那非；违法添加；人工抗原；免疫检测 A Strategy for the Preparation of Monoclonal Antibody against Vardenafil GUO Jie-biao ，XU Yang* (State Key Laboratory of Food Science and Technologe, Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University, Nanchang 330047, China) Abstract ：To generate a monoclonal antiboby specific to both vardenafil and its analogues, glutaraldehyde was used as conjugating reagent to link vardenafil to immunogen, leaving the common structure of vardenafil and its analogues exposed on the surface of conjugates as major epitode. Through optimization, immunogen with a molar ratio of 6.8:1 could induce a high titer specific antibody in sera of mice. By using hybridomas technique, 4 monoclonal antibodies with the ability to recognize vardenafil and its analogue piperidenafil were obtained. Key words ：phosphodiesterase-5 inhibitors ；vardenafil ；illegal additives ；artifacial antigen ；immunoassay 中图分类号：R392.11 ；R446.61 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)12-0045-04 磷酸二酯酶-5(phosphodiesterase-5 ，PDE-5)是特异 对伐地那非结构类似物的监管和筛查。目前，检测伐 性水解环磷酸鸟苷的酶，可抑制PDE-5 ，提高阴茎海绵 地那非的主要是高效液相色谱、液质联用等方法，同 体中环磷酸鸟苷的含量，导致阴茎动脉及阴茎海绵体的 时检测伐地那非及其结构类似物需要使用液相色谱- 离子 平滑肌舒张从而获得治疗阳痿的效果[1] 。盐酸伐地那非 阱串联质谱法[9-12] 。这些方法需要昂贵设备且运行费用 (levitra)是一种获美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗 高，难以大规模推广。而灵敏、特异、简便和价廉 阳痿的PDE-5 抑制剂药物。但近年来，该药物被违法 的免疫学快速筛查方法是一个值得关注的研究方向。