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实验一 分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作 【实验目的】 （1）了解实验的常规仪器、设备、耗材。 （2 ）掌握本实验所用仪器的功能和使用方法。 【实验内容】 一、验室的常规仪器、设备 (一) 温度控制系统： 1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最 常使用的有：4 ℃、-20℃、-80℃冰箱。 4 ℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 -20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA 、蛋白质样品等。 -80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。 0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2 ．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长 期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保 持细胞生物学特性的优点。 3 ．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。 CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2 （通常5% ），用来维 持培养液的酸度（pH值）。 37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。 4. 水浴锅：用于保温。 25-100 ℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。 25-100 ℃水浴箱用于常规试验。 5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于 RNA 方面 的实验用具，需要在250 ℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45 ℃的烤箱中进行 烘干。 （二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。 1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。 多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质 （Mn2+ 、Cu2+ 、Zn2+ 、Fe3+ 、Mo(Ⅵ) ）。 2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。 去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。 1 3 ．超纯水：用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水 循环。用于 PCR 、PCR 氨基酸分析、DNA 测序、酶反应、组织和细胞培养等。 （三）菌消毒设备：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。。 1．蒸汽消毒锅：用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消 毒且定时进行消毒 2. 紫外线：75%乙醇 、0.1%SDS （消毒剂） 一些耐高压、高温消毒且可用紫外线照射或乙醇和 SDS 浸泡。 紫外线照射使用方便，且很方便，但灭菌效果与距离有关，且产生臭氧污染安 全，用于无菌室，超净台和塑料用具的消毒。 3. 滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。 4. 煮沸消毒：主用于金属器械和针急需时采用。 （四）计量系统： 1. 称量系统：（各种天平）台秤、托盘天平、钮力摆动天平、 光电分子天平、精密电子分析天平 2. 液体体积的度量：精：量筒、移液管、微量取液器 粗：刻度试管、烧杯、锥形瓶 3. pH 值测量： pH计：测定溶液中H+ 的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生 不同的电动势用pH值表示出来。 pH 试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的 pH 值的粗略估计。而 大部分试剂的配制要求严格的 pH 值，需精确度高（小数点后两位）的 pH 计。 4