试验一典型病例观察.docVIP

实验一 典型病例观察 ㈠实验目的： 通过观察动物典型病例录像片，加深对动物疾病的了解，加深对疾病典型症状的观察，达到理论与实践结合，增强正确诊断和治疗典型病例的能力。 ㈡实验内容与基本要求： 实验观察内容：磁笼防治牛创伤性网胃炎、胸膜炎、异物性肺炎、 要求：认真观看典型病例的发病原因，临床症状，防治方法。 按实验报告的要求书写好典型病例观察的实验报告 ㈢主要器材与药品 电脑 典型病例视频教学片 实验二 药敏试验 抗菌药物在疾病防治上已得到了广泛的使用,但是对某种抗菌药物长期或不合理地使用,可引起这些细菌产生耐药性,。如果盲目地滥用抗菌药物,不仅造成药物的浪费,同时也贻误了治疗时机。药物敏感试验,是一项药物体外抗菌作用的测定技术,通过本试验,可选用最敏感的药物进行临诊治疗, 同时也可根据这一原理,测定抗菌药物的质量,防伪劣假冒产品和过期失效药物。 ㈠实验目的： 学习了解细菌对药物的敏感试验的常用方法。 学习对药物的敏感试验的操纸片法作方法。 ㈡实验内容与基本要求： 2.1用经火焰灭菌的铂耳或接种环挑起待试细菌的纯培养物，以划线接种方式将挑取的细菌涂布到普通琼脂平板或鲜血琼脂平板培养基表面。也可以挑取待试细菌于少量灭菌生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌的棉拭子沾取菌液涂布到上述培养基表面，尽可能涂布的致密而均匀。 2.2用灭菌尖头镊子，镊取己制备好的各种干燥抗菌纸药片。分别密贴到上述培养基表面，为了抗菌纸药片与培养基表面密贴，可用镊子轻按下纸片。纸片在培养基上的分布，一般可为中央贴一种纸片，外周以等距离贴若干种纸片，这样一个直径为90mm平板可贴6－7个抗菌药纸片。如果药敏纸片上没有标记，在每贴一种纸片后，应在平板底上用笔写上其药名或贴上标签。 2.3将贴好纸片的平板底部在下，置37℃温箱中培养24小时后，取出观察效果。 2.4药敏试验判断标准 抑菌圈直径mm 　　　　　　　　　　　　　　　　　敏感度 20以上　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　极敏　 15－20　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　高敏 10－14　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中敏 10以下　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　低敏 0　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　不敏感 附： 1.纸片法 各种抗菌药物的纸片,市场有售,是一种直径6毫米的圆形小纸片,要注意密封保存,藏于阴暗干燥处, 切勿受潮。注意有效期,一般不超过6个月。 　(1)试验材料 经分离和鉴定后的纯培养菌株(例如大肠 杆菌、链球菌等),营养肉汤,琼脂平皿,棉拭子,镊子,酒精灯, 药敏纸片若干。 (2)试验步骤 ①将测定菌株接种到营养肉汤中,置37℃条件下培养12小时,取出备用。②用无菌棉拭子蘸取上述菌液,均匀涂于琼脂平皿上。③待培养基表面稍干后,用无菌小镊子分别取所需的药敏纸片均匀地贴在培养基的表面, 轻轻压平,各纸片间应有一定的距离,并分别作上标记。④将培养皿置37℃温箱内培养12~18小时后,测量各种药敏纸片抑菌圈直径的大小（以毫米表示）。 2.试管法 本法较纸片法复杂,但结果较准确、可靠。此法不仅能用于各种抗菌药物对细菌的敏感性测定,也可用于定量检查。 (1)试验方法　 取试管10支,排放在试管架上,于第一管中加入肉汤1.9毫升,其余各管均各加1毫升。吸取配好的抗菌药物0.1毫升,加入第一管,混合后吸取1毫升放入第二管,混合后再由第二管移1毫升到第三管,如此倍比稀释到第九管,从中吸取1毫升弃掉,第十管不加药物作为对照。然后各管加入幼龄试验菌0.05毫升(培养18小时的菌液,Ig 1000稀释)。置37℃温箱内培养18~24小时观察结果。必要时也可对每管取0.2毫升分别接种于培养基上,经12小时培养后计数菌落。 (2)结果判定　培养18个小时后,凡无菌生长的药物最高稀释管,即为该菌对药物的敏感度。若药物本身浑浊而肉眼不易观察的,可将各稀释度的细菌涂片镜检,或计数培养皿上的菌落。 3.琼脂扩散法　　本法是利用药物可以在琼脂培养基中扩散的原理,进行抗菌试验,其目的是测定药物的质量,初步判断药物抗菌作用的强弱,用于定性,方法较简便。 (1)试验材料 被测定的抗菌药物(例如青霉素,选择不同厂家生产的几个品种,以作比较),试验用的菌株(例如链球菌),营养肉汤,营养琼脂平皿,棉拭子,微量吸管等。 (2)试验步骤 ①将试验细菌接种到营养肉汤中,置 37℃温箱培养12小时,取出备用。②用无菌棉拭子蘸取上述菌液均匀涂于营养琼脂平皿上。③用各种方法将等量的被测药液(如同样的稀释度和数量),置于含菌的平板上,培养后, 根据抑菌圈的大小,初步判定该药物抑菌作用的强弱。④药物放置的方法有多种:第一,直接将药液滴在平板上