谷胱甘肽发酵条件的优化扩大及其分离纯化毕业论文.doc

谷胱甘肽发酵条件的优化扩大及其分离纯化毕业论文 目 录 摘 要 I Abstract II 目 录 III 第1章 引 言 1 1.1 谷胱甘肽概述 1 1.1.1 谷胱甘肽结构和性质 1 1.1.2 谷胱甘肽的生理功能及其应用 3 1.2 发酵法生产谷胱甘肽的国内外研究动态 4 1.3 本研究的意义、目的及内容 9 1.3.1 意义 9 1.3.2 目的 9 1.3.3 研究内容 10 1.4 常用研究指标的说明 10 第2章 啤酒酵母Y-14发酵GSH培养基的优化 11 2.1 材料 11 2.1.1 菌种： 11 2.1.2 培养基： 11 2.1.3 主要试剂 12 2.1.4 主要仪器 12 2.2 方法 12 2.2.1 菌株活化 13 2.2.2 种子摇瓶培养 13 2.2.3 摇瓶发酵培养 13 2.2.4 菌种的保藏 13 2.2.5 DTNB法检测GSH含量 13 2.2.6 试验设计方法 13 2.3 结果与分析 14 2.3.1 显著影响因素的筛选结果 14 2.3.2 Box-Behnken设计进一步优化培养基试验结果 16 2.4 结论 19 第3章 啤酒酵母Y-14产GSH发酵条件的优化 20 3.1 材料 20 3.1.1 菌种： 20 3.1.2 培养基： 20 3.1.3 主要试剂 21 3.1.4 主要仪器 21 3.2 方法 21 3.2.1 啤酒酵母Y-14生长曲线的测定 21 3.2.2 发酵周期的优选试验 21 3.2.3 发酵温度的优选试验 21 3.2.4 发酵初始pH的优选试验 22 3.2.5 发酵摇床转速的优选试验 22 3.2.6 发酵摇瓶装液量的优选试验 22 3.2.7 摇瓶发酵产GSH的进程试验 22 3.3 结果与分析 22 3.3.1 啤酒酵母Y-14生长曲线的绘制 22 3.3.2 发酵周期的优选试验结果 23 3.3.3 发酵温度的优选试验结果 24 3.3.4 发酵初始pH值的优选试验结果 24 3.3.5 发酵摇床转速的优选试验结果 25 3.3.6 发酵摇瓶装液量的优选试验结果 26 3.3.7 摇瓶发酵产GSH进程曲线的绘制 27 3.4 结论 28 第4章10L自动发酵罐扩大发酵的初探 29 4.1 材料 29 4.1.1 菌种： 29 4.1.2 培养基 29 4.1.3 主要试剂 30 4.1.4 主要仪器 30 4.2 方法 30 4.2.1 斜面种子培养 30 4.2.2 一级种子摇瓶培养 31 4.2.3 二级种子摇瓶培养 31 4.2.4发酵罐流加培养试验 31 4.2.5 分析方法 31 4.3 结果与讨论 32 4.3.1 第一批发酵罐补料培养 32 4.3.2 第二批发酵罐补料培养 36 4.4 结论 40 第5章 啤酒酵母Y-14中还原型GSH的分离纯化 41 5.1 材料 41 5.1.1 菌种 41 5.1.2 主要材料 42 5.1.3 主要设备 42 5.2 方法 42 5.2.1 GSH提取液的制备 42 5.2.2 检测方法 42 5.2.3 相关数据的计算公式 42 5.2.4 D001大孔树脂离子交换柱的试验流程 43 5.2.5 D001大孔树脂分离GSH的研究 43 5.2.6 SephadexG-1凝胶柱的试验流程 44 5.2.7 SephadexG-10纯化GSH的研究 45 5.3结果与分析 46 5.3.1 D001大孔树脂分离GSH的研究结果 46 5.3.2 SephadexG-10脱盐纯化GSH的研究结果 50 5.3.3 SephadexG-10分级分离纯化GSH的研究结果 53 5.4 结论 56 第6章 总结与展望 57 6.1 总结 57 6.2 创新点 58 6.3 展望 58 参考文献 59 致 谢 64 附 录 65 据报道，人体内有一种神奇的物质和人的健康状况有直接的关系。这种神奇的物质，科学上称之为谷胱甘肽(GSH)。GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成具有较高的营养价值，具有保肝、抗氧化的作用，含有丰富的氨基酸、肽类物质、维生素、微量元素。近日，据有关病毒学家介绍：每天补充50毫克GSH，可快速产生还原性免疫细胞，增强人体免疫力。如果人体免疫能力强，就算被感染上病毒，也会将病毒的侵害降低到最低限度。美国著名的医学专家古特曼博士这样预测：“谷胱甘肽很快就会像胆固醇一样，成为人们衡量健康指标之一。 谷胱甘肽，是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸组成的生物活性三肽化合物[1]，广泛存在于生物体内的最丰富的非蛋白硫醇化合物[2]。其化学名为γ-L-谷氨酰-半胱氨酸-甘氨酸[3]英文名：γ-L-glutamyl-cysteinyl-glycine，