紫外诱变对Lovastatin产量的影响毕业论文.doc

紫外诱变对Lovastatin产量的影响毕业论文 目录 1.绪论 5 1.1概述 5 1.1.1洛伐他汀的发现 6 1.1.2洛伐他汀的产生菌株 6 1.1.3洛伐他汀的药用价值 6 1.1.4洛伐他汀的降胆固醇机理 6 1.2提高洛伐他汀产量的方法 7 1.2.1诱变方法对洛伐他汀生产的影响 7 微波等离子体诱变 7 紫外线诱变处理 7 紫外线、超声波复合诱变 7 重离子束诱变处理 8 1.2.2发酵条件对洛伐他汀生产的影响 8 碳源和氮源 8 其他营养成分 9 pH值 9 温度 10 含水量对红曲霉生长和洛伐他汀产率的影响 10 1.3洛伐他汀的提取工艺 10 1.4 洛伐他汀含量测定方法的研究进展 11 1.4.1国内测定方法的研究进展 11 高效液相色谱法测定洛伐他汀含量 12 薄层扫描法测定洛伐他汀含量 13 紫外分光光度法测定洛伐他汀含量 13 1.4.2国外测定方法的研究进展 13 国外 HPLC 法测定洛伐他汀的含量 14 国外气相色谱法测定洛伐他汀的含量 14 国外荧光光度法测定洛伐他汀的含量 14 1.4.3各种测定洛伐他汀含量方法的比较 15 1.5洛伐他汀的国内外研究现状 15 1.6他汀类药物在其他治疗领域的研究开发 17 2.实验材料与方法 18 2.1实验材料 18 2.1.1出发菌株 18 2.1.2实验仪器 18 2.1.3实验试剂 18 2.2 实验方法 18 2.2.1培养基的制备及菌株的诱变 18 培养基的制备 18 孢子悬液的制备 19 紫外线诱变处理 19 诱变菌株的初筛 19 诱变菌株的复筛 19 2.2.2双波长紫外分光光度法测定洛伐他汀的含量 19 实验原理 19 测定方法 20 3.实验结果与分析 21 3.1紫外诱变对菌株的影响 21 3.1.1初筛及复筛结果 21 3.2菌株A. terreus UV150-3的遗传稳定性试验 22 3.3土曲霉菌株的生长和代谢曲线 23 3.3.1生长曲线 23 3.3.2产物曲线 23 4.结论 25 致谢 26 参考文献： 27 附：英文文献翻译 301.绪论 1.1概述 洛伐他汀的分子式为C24H36O5，分子量404，分子结构如图1。熔点157-159℃，易溶于甲醇、乙醇、丙醇、乙酸乙酯、氯仿及苯中，不溶于正己烷及石油醚中。在甲醇中紫外光谱显示的最大值在229、237、246nm，在70％乙醇中的最大紫外吸收波长在236nm，在KBr溶液中的红外线光谱吸收波长为355,2970,1696,1220nm。 众所周知，心脑血管疾病已成为全球人类死亡的主要原因。在欧美等发达国家，该病的死亡率居各种疾病之首，占死亡总人数的 40 %～50 %。在我国，其死亡率仅次于恶性肿瘤，居第二位。缺血性心脑血管病的病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis)。其病理核心是胆固醇在动脉壁的沉着，几乎所有的脂蛋白均涉及此过程，诸如极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、中间密度脂蛋白胆固醇( IDL)以及三酰甘油( TG) 等。凡血浆中VLDL、IDL、LDL及载脂蛋白B(apoB) 浓度高于正常值为高脂蛋白血症，易导致动脉粥样硬化，高密度脂蛋白胆固醇( HDL)、载脂蛋白A(apoA) 浓度低于正常，也成为动脉粥样硬化危险因子[2,3]。 他汀类药物在心脑血管疾病治疗方面的应用是一次革命性的里程碑。因为它可阻断胆固醇合成的关键步骤，从而使调脂药获得突破性进展。从近几年世界药品市场来看，降血脂药物中发展得较快的品种首推HMG- CoA 还原酶抑制剂。 1.1.1洛伐他汀的发现 洛伐他汀是1979年由远腾报道从红色红曲霉中分离得到的，称为Monacolin K。1980 年Alberts等从土曲霉发酵液分离得到一个降血浆胆固醇物质，即洛伐他汀。随后人们又发现与其结构相似的Monacolin J、L、X、M、Dihydromevinolin 及Dihyfromonacolin L等成分[4]。 1.1.2洛伐他汀的产生菌株 目前，生产洛伐他汀所采用的微生物主要有三大类: 青霉菌、红曲霉和土曲霉，由于这些菌株的代谢途径多样性，发现同一个种的不同菌株产洛伐他汀的能力差别很大，多数菌株往往不能合成洛伐他汀。 在几种生产洛伐他汀的微生物中，土曲霉是工业生产中最常用的菌种。 1.1.3洛伐他汀的药用价值 如上所述，洛伐他汀是可以显著降低血胆固醇的物质，能降低活体内低密度脂蛋白(LDL)的含量，同时提高高密度脂蛋白( HDL)的含量，从而有效降低血浆中胆固醇含量。研究还证明，洛伐他汀在人体内含量只要达到 0.001～0.005μg/ mL，胆固醇的合成就会受阻，经弱碱加工形成的盐类具有防治胆结石、前列腺肥大、降低肿瘤增殖率、延