PSA检测与临床意义课件.ppt

PSA的检测及临床意义;前列腺特异抗原(Prostate Specific Antigen, PSA)是与前列腺癌相关的一种抗原。它是公认的诊断前列腺癌的较好的肿瘤标志物。前列腺癌在男性所有类型癌中占10%～20%,是男性最常见的癌肿。该病进展缓慢,是威胁50岁以上男性生命的主要癌症,在西方国家占男性死亡率的第二位。美国FDA已批准将PSA检测作为50岁以上男性的普查指标。 流行病学调查表明,随着我国居民生活水平的改善,环境污染的加剧以及饮食结构的改变,前列腺癌的发病率日趋上升,已引起临床上的高度重视。;PSA的表达及生物学特性;2.PSA为单链糖蛋白,分子量为32～34Kd,由237个氨基酸残基组成。编码PSA的mRNA全长为1729bp。PSA为一种中性丝氨酸蛋白激酶,有酶的活性,但活性水平较低,能溶解精液中的蛋白质,在精囊包的分裂和精液的液化上发挥生理作用。PSA能刺激前列腺癌细胞产生活性氧,该效应有浓度依赖性,PSA浓度愈高,刺激作用愈明显,而抗PSA抗体可抑制PSA的刺激作用。F-PSA在血液中的半衰期为110min,而TPSA的半衰期则为2～3d。 ;3.结构与表达 PSA是人类组织激肽释放酶基因家族的一个成员,位于染色体19q13.4上。人类组织激肽释放酶已被识别的有三个：hK1（胰、肾激肽释放酶），hK2（腺体激肽释放酶），hK3（PSA）。人类基因组序列测定显示在染色体19q13.3/q13.4上有15个组织激肽释放酶基因，并有相似的氨基酸序列。hK2基因与hK3相邻，基氨基酸序列与PSA有80%同源，它具有胰蛋白酶样活性，在前列腺中也有具分泌功能的上皮组织。hK2在血清中的水平如果升高，前列腺癌的风险也会增加。;4.同构型: PSA在前列腺管腔内可被蛋白酶分裂而变为同构型PSA（PSA isoforms）,也可有以proPSA被去顶（truncated form of proPSA）的形式存在，又叫[-2]pPSA。[-2]pPSA似乎也和前列腺癌有相关性。;PSA在血清中形态 1.非结合形态，即游离PSA（freePSA,FPSA）。2.结合形态 PSA在血液中有60-90%与多种内源性蛋白酶抑制物结合形成复合形PSA（C-PSA）： 与α1抗糜蛋白酶(α1-antichymotrypsin)结合,称为PSA-ACT，分子量约80-90kda. 与α2巨球蛋白(α2-macroglobulin)结合，称为PSA-AMG， 与蛋白酶C抑制体(protease C inhibitor)结合,称为PSA-PCI， 与α1抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin）结合，称为PSA-AAT。;其中，PSA-ACT是血清中C-PSA的主要构成形式，也是目前免疫学方法能测到的主要成分.其它几种结合形式，由于抗原决定部位被掩蔽，不能为检测抗体所识别。 在精液中,PSA还与Ｃ蛋白抑制物构成复合物。;二、检测;由于PSA的浓度较低，而且测到的值（绝对值）直接关系到对患者病情的判断，对检测试剂要求稳定性好，也就是重复性要好。但ELISA方法的影响因素比较多，尤其是低浓度标本的OD值容易受操作条件的影响。所以在用ELISA方法作检测的时候，要严格控制实验条件，操作人员要有一定的经验。另外，每块酶标板必须作单独的标准曲线，以保证结果的准确性。对于酶标法，接近本底孔的OD值所算出来的PSA值其准确性已大打折扣。一般来说OD值在0.15以上的结果就比较具有可比性了。按我们的经验，也就是2.0ng/ml以上的结果。 ;而发光法一般是应用在全自动分析仪上的，准确性和重复性都是比较好的，比较适合于对PSA这样微量又必须定量的指标进行测定。要注意的是，如要对TPSA和FPSA都进行测定的话，应选用同一厂家出厂的产品。不同测定原理的方法（等克分子法或等重量法）所测出的结果，不适宜用来计算F/T比值。即使只对于总PSA，不同厂家的产品因针对的抗原不同，测出的结果也不太适宜用来直接比较。 国外还有一些产品，用金标试纸条作半定量检测，适用于家庭和门诊。但由于结果不太精确，只适合于初筛。 ;美国临床生化委员会（National Academy of Clinical Biochemistry,NACB）和欧洲肿瘤标志小组（European Group on Tumour Markers, EGTM ）建议对常规肿瘤标志物测定的变异系数： 批内CV5%,批间CV10% NCCLS推荐的PSA标准品是由Stanford制备的，由90%的PSA-ACT和10%的F-PSA组成。;PSA检测中应注意的几个问题： 1.检测前准备 采集血液标本应在对前列腺作任何疹疗处理之前进行。如已有操作，则须过至少两周后采血。若要测定FPSA，则48小时内应无射精