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大规模RNAi筛选技术的时代已经来临-生命奥秘
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大规模RNA干扰筛选技术 (large-scale RNA interference (RNAi) screens )终于给科学家带来了回报:为探
索多种生物学问题,研究人员通过在哺乳动物细胞内进行大规模的RNAi筛选获得了一些线索。下文将对这项
领先技术进行介绍。
近,在高等哺乳动物细胞内展开的大规模RNA i筛选 (large-scale RNA interference
最(RNAi) screens )工作在学术界引起了广泛的关注。
美国布罗德研究所 (Broad Institute )RNAi协会主任David Root指出,研究人员直到近期才首次开展了
几次大规模筛选工作。尽管大家可能对大规模RNAi筛选技术还存在争议,但无法否认的事实是,这项技术的
确非常有用。
大规模 RNAi筛选 技术
的时代已经来临
你只需在PubMed上进行一个快速有哪些信誉好的足球投注网站便可 词典1)与siRNA 的数据资料越来越多,系统的、混
以发现,在过去短短的1年内,大规模RNA i筛选 合的筛选方法也在不断涌现,所以有越来越多的研
技术已经得到了广泛应用。例如,将其应用于研 究哺乳动物细胞的科学家开始转向选择使用大规模
究体外培 [ 1]
养人体细胞的分裂过程 、应用于鉴定 的RNAi筛选技术。但很快,研究人员发现,进行如
[2]
HIV病毒感染需要哪些宿主因子 、应用于寻找哪 此复杂的整体分析,如何进行优化以及试验数据验
[3,4]
些基因对于人类细胞是必需的 以及应用于找出 证从而得出一个有意义的结果,仍然是一个严峻的
与5q综合症5 (5q-syndrome )致病相关的基因[5] 问题。Root说道: “通常来说,你越是想从这种细
等方面。 胞水平的筛选中获得重要结果,你就越难得到你想
现在可供研究人员使用的shRNA (见文后小 要的结果。”
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使用siRNA获得想要的结果
德国德累斯顿Max Planck分子细胞生物研究院的研究人员Frank
Buchholz说道: “起初,在我们还没有获得想要的结果的时候,出现
了各种各样的对大规模RNAi筛选技术质疑的声音。”当发现人工合成
的siRNA就足以诱发哺乳动物细胞的基因沉默,而不须像以前要使用
dsRNA进行干扰来沉默基因时,人们的兴趣被点燃了。
但当研究人员兴致盎然地开始分析 “脱靶” (偏离最初预想的)
的实验结果时,他们发现,所谓的RNAi可以快速诱导基因表达沉默的
神话破灭了。
随着对 “脱靶”情况分析的逐步深入,人们发展出了一些新的解
决办法。最近,在si
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