WST 569-2017 疟原虫检测 血涂片镜检法.pdf

ICS 11.020 C62 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 WS/T 569—2017 疟原虫检测 血涂片镜检法 Microscopic examination of blood films for malaria parasites 2017-08-01 发布 2018-02-01 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 发 布 WS/T 569—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准起草单位：海南省疾病预防控制中心、江苏省寄生虫病防治研究所、中国疾病预防控制中心 寄生虫病预防控制所、云南省寄生虫病防治所、海南省农垦总局医院。 本标准主要起草人：王善青、高琪、汤林华、杨恒林、郑彬、胡锡敏、王光泽、李雨春、刘莹、欧 阳范献。 I WS/T 569—2017 疟原虫检测 血涂片镜检法 1 范围 本标准规定了血涂片镜检法检测疟原虫的技术规范。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对疟原虫的显微镜检测。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 疟原虫Plasmodium spp 疟原虫是一类单细胞、寄生性的真核动物，是疟疾（malaria）的病原体。寄生于人体的疟原虫主 要有恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）、间日疟原虫（Plasmodium vivax）、三日疟原虫（Plasmodium malariae）和卵形疟原虫（Plasmodium ovale）等。 2.2 血涂片 blood films 将血液涂制于载玻片上制成的涂片。供显微镜疟原虫检查用的血涂片包括厚血膜涂片和薄血膜涂片 两种。 3 仪器和器材 3.1 生物显微镜（100×油浸物镜、5×或10×目镜）。 3.2 计数器。 3.3 载玻片（无划痕无油污的洁净载玻片）。 3.4 推片。 3.5 血片染色架。 3.6 血片干燥架。 3.7 玻片盒。 3.8 染色盘和染色缸。 4 试剂和材料 1 WS/T 569—2017 4.1 吉氏染色原液。 4.2 pH7.2 磷酸盐缓冲液（PBS）。 4.3 甲醇（分析纯）。 4.4 香柏油或专用浸油（折射率≥1.5）。 4.5 二甲苯（分析纯）。 4.6 75%酒精。 4.7 一次性采血针。 4.8 一次性手套。 5 检测步骤 5.1 血涂片的制作 5.1.1 采血部位及取血方法 经75%乙醇消毒采血部位，待干后，用一次性采血针在耳垂或指端扎刺取血，婴儿可从拇趾或足跟 扎刺取血。取1张已消毒推片，用拇指和食指夹持推片侧缘中部，用推片左下角刮取血液4μL～5μL用于 制作厚血膜，再用该端中部刮取血液 1μL～1.5μL用于制作薄血膜。 5.1.2 厚血膜制作 取1张载玻片，将推片左下角的血滴涂于载玻片的中央偏左，由里向外划圈涂成直径0.8cm～1.0cm 的圆形厚血膜,厚度以1个油镜视野内可见到5个～10个白细胞为宜。 5.1.3 薄血膜制作 用干棉球抹净推片左下角上的血渍，然后将推片下缘平抵载玻片的中线，