第七章 微生物生长及其环境条件.ppt

影响微生物生长的因素 物理因素 化学因素 生物因素：指微生物与微生物及微生物与其它生物之间的相互关系 四、细菌群体生长的连续培养 不断加入培养液，同时移去培养物，使对数期延长的培养方法。 （一）恒浊连续培养 测定培养物的光密度 调节培养基流入和培养物流出速度 培养物维持在恒定的浊度 (二）恒化连续培养 微生物生长低于其最高生长速率 采用低浓度的限制性养料 控制稀释率 环境条件对微生物生长和代谢的影响 第二节 物理因素 温度 水分及其可给性 氢离子浓度 氧气及氧化还原电位 光和辐射 化学杀菌剂和抑菌剂 化学因素 影响微生物生长的理化因素 利用环境条件对有害微生物进行控制 防腐： 消毒： 灭菌： 利用物理、化学方法，防止或抑制微生物的生长繁殖的一种措施。 利用某种方法，杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。 利用某种方法杀死或消除所有病原微生物的一种措施。 一、温度 最低生长温度 最适生长温度 最高生长温度 总体来看微生物生长温度：－10℃~100℃ 每种微生物的温度范围： （一）微生物生长的温度类型 温泉和海底火山口 100以上 70~90 30 极端嗜热 堆肥和沼气发酵池等 70 45~60 30 嗜热 高温型 寄生环境 40~45 35~40 10~20 体温型 腐生环境 40~45 20~35 10~20 室温型 中温型 海水及食品冷藏箱 25~30 10~20 -5~0 兼性嗜冷 两极地区 15~20 5~10 -12 专性嗜冷 低温型 最 高 最 适 最 低 分 布 生长温度范围（℃） 微 生 物 类 型 表示微生物的生长速度与生长温度的关系。 Q10 = 在（t+10℃)时的生长速度 在（t℃)时的生长速度 即温度每升高10℃时，微生物的生长速度与其在升温之前的生长速度之比。 温度系数（Q10） （二）温度对微生物的影响 1、高温对微生物的影响 致死温度： 高温使大分子物质变性，使微生物死亡。 在10min内杀死某种微生物的温度界限。 致死时间： 在某一温度下杀死细胞所需的最短时间。 烘箱内热空气灭菌（160~170℃，1~2h） 火焰灼烧 干热灭菌 湿热灭菌 巴氏消毒 72℃，15s 63~66℃，30min 煮沸消毒 间歇灭菌 常规高压灭菌 121℃，15min； 115℃，30min； 常用的灭菌方法 2、低温对微生物的影响 冰箱 细胞内酶的活性降低，新陈代谢缓慢，呈休眠状态。 常采用冷藏法保存菌种 液氮罐 快速冷冻 在细胞悬液中加入甘油 防止死亡 二、水分及其可给性 （一）水的活度（water activity） 在一定温度和压力下，溶液中的蒸汽压（P）与纯水蒸汽压（P0）之比。 P P0 — aw = （二）渗透压 水可以由溶质浓度低的一边流向高的一边。 低渗溶液：渗透压低于细胞渗透压的溶液 等渗溶液：渗透压等于细胞渗透压的溶液 高渗溶液：渗透压高于细胞渗透压的溶液 高渗环境会使细胞脱水，引起质壁分离。 这种调节细胞内水分状况的溶质称为协调溶质（compatible solutes）。 10～15% 食盐 50～70% 糖 防止食品腐败 极端嗜盐菌能在15～30%盐浓度下生活。 从外界泵入离子 在胞内合成某些溶质 机理 * * 第七章 微生物的生长及其环境条件 第一节 纯培养微生物群体的生长 细胞体积增大，逐渐发生量变的过程； 生长 细胞数目增多，并且产生新一代的过程。 繁殖 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 微生物生长 一、获得纯培养的方法 从一个细胞繁殖得到的后代。 纯培养（pure culture） 细菌：分离得到单个细胞，并形成一个菌落 真菌：获得单个孢子，使之萌发产生菌丝体 1、稀释平皿分离法 （一）稀释分离法 2、平皿划线分离法 3、单细胞挑取法 样品进行充分稀释 直接挑取单孢子（单细胞） 接种于培养基上形成菌落 （二）选择性培养基的利用 加入结晶紫和青霉素分离G-细菌； 加入特定营养物质，选择所需微生物。 加入链霉素分离真菌； Mixed culture Pure culture 分离得到单菌落后要纯化 二、细菌群体生长的测量 细胞数目的增加 细胞物质的增加 群体生长 （一）细胞数量的测定 1、细胞总数的测定（total count） （1）显微镜直接计数法 缺点： ①不能区分死菌与活菌 ②不适于对运动细菌的计数 ③需要相对高的细菌浓度 ④个体小的细菌难以观察 （2）比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。 菌浓度与光密度成正比的线性范围 2、活菌数量的测定 （viable c