第三章 病毒感染力的滴定 2013.ppt

第三章 病毒感染力的滴定 一、病毒TCID50的测定 操作步骤 病毒液 出现 无CPE 累 计 出现CPE孔 稀释度 CPE孔数 孔数 CPE孔数 无CPE孔数 所占的% 10-1 8 0 51 0 100（51/51） 10-2 8 0 43 0 100（43/43） 10-3 8 0 35 0 100（35/35） 10-4 8 0 27 0 100（27/27） 10-5 8 0 19 0 100（19/19） 10-6 7 1 11 1 91.7（11/12） 10-7 3 5 4 6 40（4/10） 10-8 1 7 1 13 7.1（1/14）? 距离比例＝（高于50%病变率的百分数-50%）/（高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数） ＝（91.7-50）/（91.7-40） ＝ 0.8 lgTCID50=距离此例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数 =0.8×(-1)+(-6) =-6.8 TCID50=10-6.8／0.1ml 含义：将该病毒稀释106.8倍接种96孔细胞培养板，每孔100μl，可使50%接种孔的细胞发生病变。 2、Karber法 病毒液稀释度 出现CPE的孔数 出现CPE孔的比率 10-1 8 8/8=1 10-2 8 8/8=1 10-3 8 8/8=1 10-4 8 8/8=1 10-5 8 8/8=1 10-6 7 7/8=0.875 10-7 3 3/8=0.375 10-8 1 1/8=0.125 lgTCID50=L-d(s-0.5) L：最高浓度的稀释度的对数 D：稀释度对数之间的差 S：阳性孔比率总和 lgTCID50=-1-1×(6.37